杂化人工肝支持系统是目前人工器官研究领域的一个热点,是生物医学工程的重要课题之一.杂化人工肝系统的生物部分——肝细胞的培养是影响其发展的关键因素.该文的目的在于通过制备性能优良的大孔微载体并针对肝细胞的特异性受体进行糖基化修饰,从而提高肝细胞的培养密度和代谢活性,为提高杂化人工肝支持系统在肝功能衰竭治疗中的效率奠定基础.制备出粒径为300~500微米,孔径50~70微米,孔隙率在86﹪以上,堆密度为1.04g/ml的壳聚糖大孔微载体,并针对肝细胞表面的受体因子对微载体进行糖基化修饰.该实验以大鼠的肝脏为肝细胞供体,采用改进的胶原酶原位灌流法对原代肝细胞进行分离,得到了形态好、存活率高的原代大鼠肝细胞,一只250g左右的大白鼠可分离出1.08×10<8>个肝细胞,细胞的存活率为90﹪以上.肝细胞在修饰后的大孔微载体上保持良好的球形状态,并以聚集体的形式存在.从代谢活性看,经过糖基化修饰的微载体上细胞的白蛋白分泌和尿素合成量明显高于未修饰的,最大白蛋白分泌量为54.8mg/10<6>cells/d,最大尿素合成量为4.65umol/10<6>cells/d,这表明特异性修饰在细胞识别中起到重要作用,这种作用与肝细胞表面的受体相关.果糖对肝细胞有一定的保护和修复作用,该实验在培养基中加入一定量的果糖,测得的乳酸脱氢酶泄漏率较未加果糖保护的肝细胞明显低,说明加入果糖后肝细胞的生理活性提高.综上所述,糖基化的壳聚糖大孔微载体性能优良,细胞相容性好,对杂化人工肝支持系统的研究工作有一定的参考价值.