迟缓爱德华氏菌两个外膜蛋白的功能及其亚单位疫苗的研究

来源 :中国科学院大学(中国科学院海洋研究所) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyqtc1989
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迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是一种重要的鱼类病原菌,能引发多种养殖鱼类的严重病害,给水产养殖业造成巨额的经济损失。细菌外膜蛋白是细菌细胞的重要组成部分。本研究以迟缓爱德华氏菌的外膜蛋白为切入点,分析并研究了两个迟缓爱德华氏菌的外膜蛋白功能(命名为:Omp1Et和Omp2Et)。研究发现Omp1Et和Omp2Et位于迟缓爱德华氏菌的外膜表面,推测是与毒力相关的外膜蛋白。重组表达的Omp1Et和Omp2Et蛋白(r Omp1Et和r Omp2Et)能够与牙鲆外周血淋巴细胞结合。为了进一步研究这两个外膜蛋白的功能,我们利用缺失敲除的方式,构建了两株迟缓爱德华氏菌的基因敲除株,即基因Omp1敲除株TX01Δomp1和Omp2基因敲除株TX01Δomp2。敲除株TX01Δomp1和TX01Δomp2的毒力与野生株相比,在致死率,细胞侵染和黏附,运动性及其生物膜形成能力方面显著降低。与野生株相比,敲除株TX01Δomp1侵染组织的能力明显下降;TX01Δomp1和TX01Δomp2在过氧化氢中的存活率显著降低;TX01Δomp1在酸性条件下的存活率显著降低。利用r Omp1Et和r Omp2Et构建的亚单位疫苗免疫牙鲆,发现r Omp1Et和r Omp2Et亚单位疫苗能够增强牙鲆产生的免疫反应,帮助牙鲆抵御迟缓爱德华氏菌的感染。综上所述,研究表明Omp1Et和Omp2Et是位于迟缓爱德华氏菌外膜表面的毒力相关因子,并且Omp1Et作为亚单位疫苗,能诱导牙鲆免疫系统产生良好的免疫反应。本研究首次证实了Omp1Et和Omp2Et是位于迟缓爱德华氏菌外膜表面的毒力相关因子,构建的Omp1Et和Omp2Et亚单位疫苗对于牙鲆感染迟缓爱德华氏菌有良好的免疫保护效应。
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