各国药典对于异丙安替比林中杂质没有进行液相色谱方法的控制及详细杂质研究,针对新华制药股份有限公司生产异丙安替比林原料药,进行杂质分析方法研究,找出最佳的色谱条件,并进行方法学验证；对异丙安替比林有关物质进行合成制备,并进行化学结构归属；对异丙安替比林原料药中存在的未知杂质进行化学结构确认,并随机选取异丙安替比林样品进行测定,以验证分析方法是否适用于异丙安替比林的有关物质的测定。首先建立异丙安替比林中有关物质的测定方法,对异丙安替比林进行了强酸、强碱、热、光照、氧化等破坏试验,针对各条件下产生的杂质,对测定条件进行优化选择,包括色谱柱、流动相、波长等,确定了色谱条件,同时进行专属性、准确度、精密度、线性及范围、耐用性、检测限及定量限等方法学验证；其次针对异丙安替比林原料药中存在的未知杂质,采用两种途径进行结构确认：其一采用色谱法,得知异丙安替比林中两个未知杂质的保留时间分别与对照品完全一致；其二采用LC-MS联用技术,对两未知杂质的质谱图进行综合分析,同时将杂质的质谱图谱和紫外吸收光谱与对照品的相应图谱分别进行对比,确定了未知杂质的结构。通过研究得出的最佳高效液相色谱法条件：检测波长210nm；色谱柱：Shim-packCLC C8(4.6×150mm,5μm)；流动相：磷酸盐缓冲液(0.05mol/LKH2PO4的[水/乙腈(60+40)]溶液,pH为5.2)。通过对分析方法的验证,表明该方法的专属性,精密度、线性及范围、准确度均符合要求,灵敏度高,对异丙安替比林中各杂质的存放时间及流动相有机相比例变化的耐用性试验均合格,并证明了异丙安替比林样品溶液非常稳定,适合有关物质的测定。本课题建立的方法可以更好地控制异丙安替比林中有关物质的含量,对异丙安替比林中的所有杂质能准确测定,该分析方法灵敏度高、简便、准确,对异丙基安替比林成品的质量控制有重要意义。