伪狂犬病病毒是疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科的成员，可以引起猪、牛、羊及野生动物的伪狂犬病(又称Aujeszky氏病)，猪是该病毒的天然宿主、也是主要感染源。伪狂犬病给养猪业造成了巨大经济损失，其危害仅次于猪瘟和口蹄疫。作为主要的诊断抗原，伪狂犬病病毒糖蛋白E(glycoprotein,gE)在伪狂犬根除计划中发挥重要的作用。为获得大量的、成本较低的诊断抗原，本研究利用大肠杆菌表达系统对伪狂犬病病毒gE主要抗原区域进行了表达，为gE-ELISA试剂盒的研制提供一定的理论依据和借鉴。本研究主要内容：根据GenBank中伪狂犬病毒gE基因序列，设计了一对引物，PCR扩增长度为558bp的gE基因去信号肽后的主要抗原区域(157-714bp)，将其克隆进测序载体PGEM-Teasy中，成功构建质粒PGEMTeasy-gE。用BamhI和HindⅢ将gE基因主要抗原区域从PGEM-Teasy中切出，然后与同样酶处理的原核表达载体pet32a连接，命名为pet-gE。在IPTG的诱导后，经SDS-PAGE电泳发现43ku处出现特异性蛋白条带。研究了目的蛋白表达量与各个培养条件的关系，优化后的最佳表达条件为IPTG浓度为1mM，诱导时间为5小时时的蛋白表达量最大。经过western-blot分析，表达产物具有很好的抗原性。该研究成功表达出具有抗原性的目的蛋白，为血清学鉴别诊断方法gE-ELISA的建立打下很好的基础，同时gE-ELISA也能对野毒和疫苗毒进行鉴别。