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研究目的：
观察神经生长因子(NGF)在人脑胶质瘤中的表达及亚细胞定位情况，探讨其与胶质瘤生物学行为的关系，并利用NGF在胶质瘤中特异性核转位的现象，以NGF为“载体”，125I为“弹头”，制备细胞核靶向抗胶质瘤药物125I—NGF并评价其体外抗肿瘤活性。
研究方法：
(1)以胶质瘤细胞株U251为研究对象，通过免疫荧光染色，免疫印迹等方法观察NGF的亚细胞定位，探讨其分布模式随细胞周期变化的关系。
(2)通过MTT试验观察NGF对U251细胞生长的影响。
(3)以临床手术切除的人脑胶质瘤标本为研究对象，通过免疫组织化学染色及免疫印迹等方法观察NGF的核转位情况，结合临床资料分析NGF的核转位发生率与胶质瘤恶性程度及患者预后的相关性。
(4)采用联结标记法将俄歇电子发射体125I与NGF进行偶联得到125I—NGF。通过平板克隆形成试验观察给药后胶质瘤细胞的增殖能力、流式细胞仪检测各细胞周期细胞比例、彗星试验及微核形成试验观察胶质瘤细胞DNA损伤情况，评价125I—NGF的体外抗胶质瘤活性。
研究结果：
(1)NGF在胶质瘤细胞株U251中存在多靶点分布模式，在G1期，U251细胞合成并分泌36kDaNGF出细胞；S期U251细胞摄取NGF并将其转运进核；M期，NGF与γ—tublin共定位于中心体，P—TrkA与α—tublin共定位于纺锤丝。
(2)通过MTT试验我们发现外源性NGF处理的U251细胞增殖加快；NGF抗血清中和细胞外分泌型NGF后，细胞增殖减慢。
(3)在临床手术切除的胶质瘤组织中，我们发现NGF亦存在核转位现象，并且病理分级恶性度高或预后不良者NGF核转位率都较高。胶质瘤组织蛋白样品及脑脊液免疫印迹检测结果显示：高恶性度的胶质瘤组织及脑脊液中NGF含量较高。
(4)通过联结标记法将放射性核素125I与NGF偶联得到的产物125I—NGF在体外性质稳定，可以转位进入U251细胞核内，并且表现出G1/S期特异性抗胶质瘤活性，联合应用羟基脲可以增强其抗胶质瘤疗效。
结论：
1．NGF在人脑胶质瘤细胞株U251中的亚细胞定位存在明显的细胞周期特异性。
2．无论外源性还是内源性NGF都具有显著的促进胶质瘤细胞生长作用。
3．在临床胶质瘤手术标本中，同样存在NGF核转位现象，并且病理分级恶性度高或预后不良者NGF核转位率都较高。检测胶质瘤组织中NGF核转位率可以作为胶质瘤预后判断的指标，并且检测脑脊液中NGF含量可以用于胶质瘤早期诊断及术后病情监测。
4.125I—NGF可以作为G1/S期特异性细胞核靶向抗胶质瘤药物。联合应用羟基脲可以增强其对胶质瘤细胞的杀伤效率。