1927年4月蒋介石建立南京国民政府。第一次北伐的迅速成功,让担任国民革命军总司令的蒋介石迅速成为炙手可热的人物。列强想方设法与蒋介石接触,特别是在他发动“四·一二政变”、公开与苏联和中国共产党决裂之后,列强初步认识了这个他们眼中的“稳健派”的代表。同时,这也给列强调整对华政策提供了契机,英国、日本等列强在此前后纷纷开始逐步调整对华政策。对于在中国有重大利益和影响力的美国来说,自然也不能置身其外。随着蒋介石迅速在南京建立政权,美国对蒋介石本人及其领导下的新政府有了初步的认知。同样,为巩固政权,南京国民政府采取了“联美抑日反苏”的外交政策,这一政策也为其后长期的外交方针的制定奠定了基础。随着双方接触的逐渐增多,矛盾甚至冲突也不可避免,“宁案”就是一个典型的例子,双方围绕“宁案”的纠纷在经历了长时间的争吵与磋商之后才得以化解。南京国民政府在争取获得国际外交承认上也极力争取率先取得美国的支持,“宁案”的解决无疑为日后双方建交扫清了一大障碍。随后,蒋介石为了完成全国的最终统一而进行的第二次北伐因严重触动日本的利益而遭到武装干涉。在与日本的交涉中,除了自身的抗争之外,蒋介石也不可避免地要把美国拉入到这场博弈中来。在蒋介石和东北军方面与苏联围绕“中东路”问题爆发冲突时,蒋也没有忘记美国的影响力。除此之外,此时尚高举“革命外交”大旗的蒋介石,在争取关税自主权与废除不平等条约的双重压力下也不得不倚仗美国的支持与配合,而美国也确实在这一过程中扮演了至关重要的角色。