大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)是腹泻性贝毒(diarrheic shellfish poisoning,DSP)的主要成分,贝类滤食DSP毒素产毒藻后可在体内积累毒素,通过食物链传播,进而引起人类发生腹泻性中毒。但贝类对贝毒素具有一定的耐受性,其耐受机制目前尚不清楚。I相代谢酶细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450)在外源化合物的生物转化和代谢中扮演重要的角色。为了明确I相代谢酶细胞色素P450在双壳贝类中DSP毒素代谢解毒中的作用,本文我们以翡翠贻贝(Perna viridis)为研究对象,首先通过生物信息学手段,获得翡翠贻贝消化腺组织中CYP3A4、CYP1A1、PXR和AHR四个基因观全长的cDNA序列。在此基础上,以利玛原甲藻(Prorocentrum lima)为DSP毒素的来源,利用实时荧光定量PCR技术分析染毒后,翡翠贻贝消化腺中CYP3A4、CYP1A1、PXR和AHR的mRNA表达变化,进一步检测添加了CYP3A4和CYP1A1的特异性抑制剂酮康唑(Ketoconazole)、克霉唑(Clotrimazole)以及激活剂利福平(rifampicin)、β-萘黄酮(β-naphthoflavone)后,贻贝消化腺中CYP3A4和CYP1A1活性变化以及OA的含量变化。采用高效液相质谱联用(HPLC/MS-MS)方法,探讨了体外贻贝消化腺对OA的代谢及其产物,进一步分析了CYP3A4的可能作用。研究发现,投喂利玛原甲藻后翡翠贻贝消化腺中CYP3A4表达量显著上调,CYP1A1和AHR mRNA表达显著降低,PXR的表达并未发生显著变化。提示CYP3A4、CYP1A1和AHR可能参与了翡翠贻贝对DSP毒素的代谢。添加酮康唑后,翡翠贻贝CYP3A4活性显著降低,OA含量显著降低。添加利福平后,CYP3A4活性并未增强,反而显著降低,OA含量无明显变化,提示利福平对CYP3A4活性的影响存在种属差异。添加β-萘黄酮后,CYP1A1活性增强,OA含量显著增加。克霉唑处理组CYP1A1酶活和OA浓度均未发生明显变化。采用液相色谱质谱发现,翡翠贻贝消化腺匀浆可将OA代谢成母离子为m/z 819,碎片离子为m/z为563和255的产物,证实翡翠贻贝消化腺对OA确实具有一定的转化能力,加氧或者羟化是DSP毒素在贝体内代谢的重要形式。贝类CYP3A4的活性受到抑制后,未能检出该代谢产物,进一步提示CYP3A4在OA的代谢中发挥重要作用。综上,翡翠贻贝消化腺对DSP毒素确实有一定的转化能力,CYP3A4在DSP毒素的代谢中发挥重要作用。