研究背景:静脉血栓栓塞症(venous thromboembolism,__VTE)是全球重大的负担疾病,肺栓塞是继急性心肌梗死和中风之后,第三大常见的急性心血管疾病,引起静脉血栓的风险因素包括年龄、肥胖、近期手术史、创伤、肿瘤、内科疾病等。华法林是用于治疗静脉血栓栓塞中最常使用抗凝药物,在不同的个体之间使用华法林需要剂量有很大不同,甚至可能相差20倍以上,华法林剂量不足起不到治疗效果,超量会引起出血等风险,因此调节华法林剂量是临床医生困扰的问题。影响华法林剂量包括非遗传因素(身高、年龄、体重等)和遗传因素(VKORC1、CYP2C9、GGCX、PROC、KEPHX1、CYP4F2等基因多态性),而决定华法林维持所需剂量主要是VKORC1、CYP2C9基因的多态性,现在越来越多研究关注华法林稳定剂量预测模型,其中目前有权威且使用较多的预测模型,即国际华法林组织(International Warfarin Pharmacogenetics Consortium,IWPC),本文旨在分析静脉血栓栓塞的危险因素、静脉血栓栓塞患者基因多态性分布情况、VKORC1和CYP2C9基因多态性的对华法林剂量的影响和建立适应于静脉血栓栓塞患者华法林维持剂量预测模型。目的:1.分析静脉血栓栓塞形成的相关危险因素,预防并减少静脉血栓栓塞发生。2.运用基因芯片检测静脉血栓栓塞患者CYP2C9和VKORC1基因型,研究基因型多态性对华法林维持剂量影响及建立适应于静脉血栓栓塞患者华法林维持剂量预测模型。方法:本研究为回顾性研究,研究对象选取为2015年6月至2017年2月在广州市第一人医院住院并接受静脉血管彩超和/或胸部CTA或静脉血管造影检查确诊为VTE的患者90例,分析其相关危险因素及抗凝方法。其中有65例患者均为口服同一厂家华法林(3mg/片,Orion Corporation芬兰)抗凝且华法林现已达到稳定剂量(连续监测3次且INR在2-3之间)。采集患者的一般临床资料(性别、年龄、身高、体重、静脉血栓栓塞类型等),并抽取外周静脉血,采用基因芯片技术检测这65例VTE患者CYP2C9和VKORC1基因型,其中CYP2C9*1/*1型患者60例(92.3%),CYP2C9*1/*3型患者5例(7.7%),VKORC1基因A/A型51例(78.5%),A/G型13例(20%),G/G型1例(1.5%),根据VKORC1基因及CYP2C9基因多态性进行分组,采用独立样本t检验对不同VKORC1、CYP2C9基因型之间华法林维持剂量进行比较,采用简单线性回归分析性别、年龄、身高、体重、静脉血栓栓塞类型、VKORC1、CYP2C9基因多态性对VTE患者华法林维持剂量的影响,并进一步采用多重线性回归建立适应于VTE患者华法林给药剂量预测模型。结果:1.入选90例VTE患者中,60(66.7%)例为深静脉血栓(deep venous thrombosis,__DVT),其中58例为下肢深静脉血栓,2例为上肢深静脉血栓;10(11.1%)例为肺栓塞(pulmonary embolism,__PE);20例(22.2%)例为DVT+PE。2.90例VTE患者中,其中70例(77.8%)使用用华法林抗凝,19例(21.1%)用新型抗凝剂利伐沙班,1例(1.1%)使用低分子肝素抗凝。3.入选的VTE患者中出现频率较多的危险因素为年龄、肥胖、下肢水肿、卧床。4.入选的65例VTE患者行基因检测得到:CYP2C9*1/*1+VKORC1 A/A、CYP2C9*1/*1+VKORC1 A/G、CYP2C9*1/*1+VKORC1 G/G、CYP2C9*1/*3+VKORC1 A/A、CYP2C9*1/*3+VKORC1 A/G 5种基因型,分别占:72.3%、18.5%、1.5%、6.2%、1.5%。其中CYP2C9基因型检测到CYP2C9*1/*1、CYP2C9*1/*3,分别占92.3%、7.7%,未检测到CYP2C9*1/*2、CYP2C9*2/*2、CYP2C9*2/*3、CYP2C9*3/*3型,VKORC1基因型检测到VKORC1 A/A、VKORC1 A/G、VKORC1 G/G型,分别占78.5%、20%、1.5%。CYP2C9等位基因为CYP2C9*1、CYP2C9*3,分别占96.2%、3.8%,未检测出CYP2C9*2,VKORC1等位基因为VKORC1 A、VKORC1 G,分别占88.5%、11.5%。5.仅考虑VKORC1基因多态性的影响,VTE患者中VKORC1基因型为A/A组比A/G+G/G组华法林维持所需日均剂量少,差异具有统计学意义。[(2.79±0.89)mg vs(4.34±1.05)mg,P<0.001].6.仅考虑CYP2C9基因多态性的影响,VTE患者中CYP2C9基因型为*1/*1组比*1/*3组所需的华法林维持所需日均剂量多,差异具有统计学意义。[(3.21±1.09)mg vs(2.1±0.98)mg,P=0.03].7.通过单因素回归分析,VTE患者中年龄、身高、体重、静脉血栓栓塞类型、VKORC1、CYP2C9基因的多态性对引起华法林剂量的个体差异有统计学意义(P<0.05)),年龄、身高、体重、VKORC1、CYP2C9基因的多态性分别能解释7.3%、10.1%、10.8%、16.8%、12.0%VTE患者华法林剂量的个体差异,静脉血栓栓塞类型、性别却对华法林剂量的个体差异无统计学意义(P>0.05)。8.以维持所需华法林日均剂量定义为因变量dose,以性别(女=0、男=1)、年龄(year)、身高(cm)、体重(Kg)、静脉血栓栓塞类型(深静脉血栓=0;肺栓塞、深静脉血栓+肺栓塞=1)、CYP2C9基因型(*1/*1=0、*1/*3=1)、VKORC1基因型(A/A=0、A/G+G/G=1)为自变量,进行多元逐步线性回归分析,建立静脉血栓栓塞患者华法林个体剂量预测模型为dose(mg)=5.058+1.322*VKORC1-1.535*CYP2C9-0.031*age,本研究建立的是静脉血栓栓塞患者华法林维持剂量预测模型,可以解释44.2%华法林维持所需剂量的个体差异。结论:1.本研究静脉血栓栓塞患者好发于下肢静脉。主要治疗方式以华法林抗凝为主。2.本研究VKORC1、CYP2C9基因型中,分别以A/A、*1/*1型最多。3.年龄、身高、体重、VKORC1、CYP2C9基因的多态性对华法林维持剂量个体差异有影响,其中VKORC1、CYP2C9基因的多态性是主要决定因素。4.建立静脉血栓栓塞患者华法林维持剂量预测模型,纳入VKORC1、CYP2C9、年龄三个自变量,可以解释44.2%华法林维持所需剂量的个体差异。