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热性惊厥(Febrile convulsion，FC)在全部小儿人口中的发病率约5％-6％。长程FC导致海马硬化和成年颞叶癫癎存在两种可能的机理：一是在FC出现之前已经由于遗传或获得性原因存在脑神经解剖或功能的病变即脑损伤；二是发育期FC发作首先造成大脑损伤，量变的逐渐积累最终发生海马硬化(MTS)和临床难治性颞叶癫癎(TLE)。 深入探讨PC对脑损伤的影响需要借助动物研究。Soltesz课题组应用长程FC动物模型发现单次惊厥后24h内海马和杏仁核等边缘系统出现大量神经元嗜银样变性。该病变持续至少2周，但未发现明显的DNA凋亡。Dube等的研究进一步表明发育期经历长程FC后降低对化学致惊剂和物理刺激所致惊厥的阈值，使大鼠发生边缘性惊厥的易感性明显提高，一直持续到成年，提示可能与边缘系统兴奋性的持续上调密切相关。 然而仍有许多深层次问题有待阐明，如神经元由热应激性改变到兴奋性迅速提高而爆发FC的级联反应过程中，脑功能改变的神经解剖学基础是什么?FC对控制神经元功能的某些神经活性物质表达的影响如何?尤其是发育期脑对惊厥的易感性和易损性与成年脑明显不同，如何判断FC后脑内易感神经元早期轻微损伤? 为此，本研究采用热应激致21日龄大鼠惊厥模型，着重于对单纯热应激(Heat stress，HS)和FC大鼠神经元兴奋标记物Fos、应激反应标记物热休克蛋白(HSP-70)、抗惊厥神经肽胆囊收缩素(CCK)以及神经内分泌免疫网络中介体催乳素(PRL)的免疫反应性(Immunor eactivity)在不同脑区的定位表达进行分析，同时结合MRS波谱分析观察HS和FC对不同脑区神经细胞代谢和损伤的影响。旨在探讨FC对易感神经元早期轻微损伤的影响，阐明HS和FC的神经解剖学基础，最终达到为临床合理干预提供依据。一 第一部分 急性HS与F’C幼龄大鼠脑内FOS、HSP－70、CCK 和PRL的兔疫反应性研究目的 探讨诽和 FC对脑内 FOS。HSP－70、CCK和 PRL免疫反应性定位表达的影响，揭示FC发生的神经解剖学机制和对脑神经元兴奋状态及轻微损伤的影响，为临床合理干预提供依据。方法 采用热水浴诱导 21日龄大鼠 FC模型，应用免疫组织化学技术，对HS和 FC大鼠 F。S。HSP－70、CCK以及PRL的免疫反应性在不同脑区的定位表达进行比较分析结果一、F。S的兔疫反应性1．FOS－IR阳性细胞的分布 正常对照组大鼠大脑皮层偶见零星淡染的圆形棕褐色细胞核，无定位分布特征。HS组FOS－IR阳性细胞分布具有明显群集分布特征，丘脑内呈典型核特异性分布，主要位于丘脑中线一带，即自侧脑室的背侧部沿中线延伸至第三脑室的背侧部，包括丘脑室旁核（PV）。内侧背核中间部（IMI））、中央内侧核（CM）＼菱形核（Wb）和连接核（Re），而其两侧的丘脑内侧背核（MD）、丘脑外侧后核（LP）、丘脑后核（PO）、丘脑腹后内侧核（VPM）则无表达。下丘脑室旁核小细胞部（PVN）明显表达，而下丘脑外侧区（LH）、下丘脑腹内侧核 （VMH）、弓状核（Arc）和下丘脑视上核（SON）则无表达。大脑皮层见于杏仁周皮质（PIR）、内嗅皮质（Ent）、嗅周皮质（PRH）、顶皮质（PAR）＼压部后皮质（RSG，RSA）、额皮质（Fr）等区域，PIR和 En工主要见于工1层。海马内偶见阳性细胞，杏仁核阴性。FC组海马明显表达，在丘脑和下丘脑则呈弥漫性分布，缺乏明显核团分布特征，PIR和Ent全层分布，11、IVVI层明显表达。2．FOs－IR阳性细胞数量比较 经镜下计数及统计学处理表明，两组NS－IR阳性细胞数明显高于对照组（P（．01）。FC 3 浙江大学搏土学位论文2003组大鼠大脑皮层各区和海马各区FOS阳性细胞数明显高于HS组大鼠 P＜0刀1）o 对海马F。s－IR阳性细胞阳性单位比较发现，FC组明显高于HS组p＜0刀1）。二、HSP－70的免疫反应性 HS组和对照组未见HSP70－IR阳性细胞，而叮组则于大脑皮层、海马、杏仁核、丘脑及下丘脑见大量HSP70－IR阳性细胞，呈弥漫性分布，无明显核团分布特征。三、CCK和 PRL的兔疫反应性1．CCK－IR和 PRL－IR阳性细胞的分布 对照组各动物中，大脑皮层偶见零星表达，着色淡且无定位分布特征。HS组CCK（R和PRL－IR FH性细胞在大脑皮层分布极为相似，免疫染色有共深或共浅的倾向，PIR、Ent和 RS免疫染色较深，PRH、PAR和 Fr染色较浅；另外 PRL－IR阳性细胞还分布于丘脑中线一带，而CCK－IR阳性细胞则仅见于大脑皮层，海马和杏仁核未见表达。而FC组则于大脑皮层、海马、杏仁核、丘脑及下丘脑见大量 CCK－IR和 PRL－IR阳性细胞，呈弥漫性分布，无明显核团分布特征。2．CCK－IR和 PRL－IR阳性细胞的数量比较 经镜下计数及统计学处理表明，两组大脑皮层CCK－IR、Pffe－IR阳性细胞数明显高于对照组（P＜0．of）。FC组大鼠大脑皮层各区CCK－IR阳性细胞数明显高于HS?