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目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种老年人常见的痴呆类型,以进行性认知功能障碍和行为异常为特征的神经系统退行性病变。脑组织里出现大量老年斑以及神经原纤维缠结是AD主要的病理学特征。其中,β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)作为老年斑的主要成分,具有非常严重的神经毒性,所以影响着AD的形成和发展。有研究显示内质网应激的三个通路蛋白表达状态变化,将导致细胞的凋亡,进而引发疾病。本实验通过建立AD细胞模型,研究Aβ25-35诱导HT22细胞内质网发生应激时,介导内质网应激的三个通路蛋白表达水平的变化及二苯乙烯苷(Tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)对其的保护作用。方法:将HT22细胞分为未分化组和分化组,未分化组加入完全培养基培养48小时,分化组为完全培养基贴壁生长24小时后加入分化液(Neurobasal培养基和N2添加剂)培养24小时后,Western blot检测两组细胞的ATF6、PERK、IRE1蛋白表达量的变化。不同浓度的Aβ25-35分别作用于两组HT22细胞24小时,用MTT测定细胞活力变化。确定最佳AD细胞模型,将分化型HT22细胞分为对照组、Aβ处理组和Aβ+TSG组,最佳抑制浓度的Aβ25-35作用于HT22细胞24小时,加入TSG(0、100、300、500μmol/L)用MTT测定细胞活力变化,免疫细胞荧光检测内质网应激三个通路蛋白的表达位置,及Western blot检测ATF6、PERK、IRE1蛋白表达量的变化。结果:1.ATF6、PERK、IRE1蛋白在未分化组的表达量明显高于分化组的表达量。Aβ25-35对未分化组细胞虽有损伤作用,但各组间无明显差异,且无剂量依赖关系。Aβ25-35可以诱导分化组HT22细胞发生损伤,且呈剂量依赖关系,Aβ25-35(20μmol/L、40μmol/L)作用于分化组HT22细胞24小时,细胞存活率分别为66%、60%,AD模型最佳。2.Aβ25-35可以诱导HT22细胞发生内质网应激,且这种内质网应激同Aβ的浓度具有一定的相关性。免疫细胞荧光检测ATF6、PERK、IRE1在细胞核及细胞浆内均有表达。ATF6、PERK蛋白的表达在Aβ处理组增加,在Aβ+TSG组减少。结论:Aβ25-35可诱导分化型HT22细胞建立AD细胞模型,且浓度为20μmol/L最佳。Aβ25-35可诱导HT22细胞发生内质网应激,且TSG对其有保护作用。