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多糖是冬虫夏草中最重要生物活性物质之一,同时也是当前研究的热点之一。通过Box-Benhnken法设计响应面优化超声辅助提取冬虫夏草菌丝体多糖,得到最优条件为超声时间32.2 min,超声功率507 W,液料比29:1,最优条件下多糖得率为13.8%。多糖提取液经分级醇沉得到三种醇沉组分CSP40、CSP60、CSP80。实验表明三个醇沉组分均具有较好的抗氧化活性,从强到弱依次为CSP40>CSP80>CSP60,其中CSP40在最大浓度5 mg/mL时DPPH自由基清除率为61.0%,ABTS自由基清除率为99.6%,羟基自由基清除率为63.9%。抗肿瘤实验表明三者对CHL仓鼠正常肺细胞和A549人肺癌细胞均有细胞毒性,但选择性不强,需要进一步纯化。粗多糖CSP40经过DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl S系列凝胶柱层析纯化得到CSP40-2a和CSP40-2bI。纯多糖CSP40-2a与CSP40-2bI对A549肺癌细胞的抑制率相较CSP40都有较大提高,选择性细胞毒性较高。分别对CSP40-2a与CSP40-2bI进行乙酰化处理后用气相-质谱联用测得其单糖组成。结果表明,CSP40-2a主要由三种单糖组成,分别是D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,其摩尔比为1.98:1.0:0.67。CSP40-2bI主要也由这三种单糖组成,但其摩尔比为0.72:1.00:0.30。甲基化分析检测到10种CSP40-2a甲基化产物,8种CSP40-2bI甲基化产物。对照二者甲基化结果发现CSP40-2a残基种类仅比CSP40-2bI多两种,但其相同种类的残基含量有所区别。核磁共振研究表明CSP40-2a、CSP40-2bI残基种类略有不同,但其残基含量差别较大。同时CSP-2bI存在CSP40-2a中没有的（?）（R1、R2、R3为未知基团）。