副猪嗜血杆菌（Haemopilus parasuis，HPS)是猪上呼吸道的一种共栖菌，它可在特定条件下侵入机体而引起猪的多发性浆膜炎和关节炎(革拉泽氏病Glasser’s disease)。该菌对产房以及保育舍仔猪感染率极高，给我国养猪业带来重大损失。　　 副猪嗜血杆菌的分离培养成为该病诊断的最可靠证据。但是，由于副猪嗜血杆菌十分娇嫩，营养要求苛刻，初次分离培养时生长缓慢，且继发和并发感染的其它细菌同时出现，以及抗生素的广泛使用，使得分离培养难道比较大。本研究从广东各地猪场收集病变典型病料，共分离得到44株细菌。通过生化试验、卫星现象和PCR鉴定所分离菌为HPS。药敏试验表明大部分分离株对头孢类较为敏感，而对四环素类、喹诺酮类表现出普遍耐药性。　　 本研究通过对模板浓度、引物浓度、DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度和退火温度等影响ERIC-PCR扩增的因素进行了探索和优化，最后确定了反应体系中引物最适浓度为0.166μmol/L～0.333μmol/L，DNA聚合酶最适浓度为1.OU/μL，模板最适用量为8ng/μL，dNTPs浓度为200μmol/L反应体系，建立了重复性好可比性高的ERIC-PCR分型方法。应用所建立的方法对分离菌株进行分型，共得10种类型菌株，与Rafiee的15种标准血清型ERIC-PCR图谱比较，得到血清2型(9.1％)、血清4型(22.7％)、血清5型(29.5％)、血清10型(4.55％)、血清12型(11.4％)和血清13型(13.6％)，另外有4株不能有效分型。ERIC-PCR分型结果与琼脂扩散试验结果符合率高达93.2％，且通过ERIC-RCR方法能将交叉反应的菌株进行分型，进一步说明所建立的分型方法能对分离菌株进行有效分型。　　 副猪嗜血杆菌血清型众多，且血清型之间的交叉保护力很弱，针对我省流行的毒株研制疫苗，成为控制该病的一个有效手段。本研究通过对血清4型和5型分离菌株进行活力测定、毒力试验和免疫原性试验，选择血清4型湛江090312株和血清5型鹤山090324株作为疫苗菌株。对KM小鼠的安全性试验和断奶仔猪超剂量接种安全性试验结果显示，本实验制备的HPS灭活疫苗具有良好安全性。通过对免疫仔猪抗体水平消长规律测定发现，免疫二周后可以检测到抗体，第8周左右达到高峰。攻毒保护性试验结果表明该疫苗对免疫仔猪提供了足够的保护力，符合疫苗效力检验的标准。