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新孢子虫病(Neosporiasis)是由犬新孢子虫(Neospora caninum)寄生于犬、牛、马、羊等多种宿主动物细胞内而引起的一种原虫病。该病对牛的危害尤为严重,主要造成孕畜流产、死胎以及新生犊牛的运动神经系统疾病。目前新孢子虫病的研究已成为国内外兽医寄生虫学界的热点问题,在我国对该领域的研究刚刚起步。 本研究以体外培养于Vero细胞上的犬新孢子虫美国分离株Nc-1作为抗原,包被到载玻片上,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的兔抗牛IgG作为二抗,建立了间接荧光抗体试验方法(IFAT)。对IFAT的反应条件进行了摸索,确定了最适工作条件。结果表明,新孢子虫虫体最佳工作稀释度为5×10~3-5×10~4个/ml,FTIC-兔抗牛IgG(H+L)的最适工作稀释度为1:80,待检血清最适工作稀释度为1:200。经交叉反应试验和重复性试验,表明建立的间接荧光抗体诊断方法是特异的,且重复性良好。本试验诊断方法能够同时检测大批量样品,对牛新孢子虫病疫情的监测有一定的指导意义。 采集吉林省21个县、市的1091份牛血清样本,用所建立的间接荧光抗体试验方法(IFAT)检测牛新孢子虫血清抗体,首次对吉林省地区进行牛新孢子虫病的流行病学调查。调查结果发现,1091份牛血清样本中189份血清的牛新孢子虫抗体呈阳性,试验测得的血清阳性率为17.32%。将血清样本的检测结果按不同地区、性别、年龄、胎次分别进行比较,结果发现牛新孢子虫的感染情况在性别、年龄、胎次上无明显差异,但在地区上稍微有所差异,与现可查牛新孢子虫病流行病学调查报道基本一致。