人参内生多粘类芽孢杆菌同时降解5种农药及其产物特性的研究

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农药的过量甚至违规使用时有发生,严重影响人参的产品质量和安全,人参农药残留代谢缓慢,残留时间长,如何降低甚至去除人参中农药残留已成为研究热点。人参内生多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)是美国FDA规定可直接用于食品的益生菌,也是我国免于安全性检查的益生菌,安全性极高,其不仅在生物防治方面具有很好的应用,还在促进人参生长和转化人参皂苷方面有良好作用,但未见利用其降解人参农药残留方面应用报道。本文旨在探讨人参内生多粘类芽孢杆菌对5种农药氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕的降解作用及其规律。首先,建立了同时测定5种农药氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕的气相色谱检测法。其次,通过气相色谱法测定人参内生多粘类芽孢杆菌对5种农药的降解率,同时以人参内生多粘类芽孢杆菌的活菌数及芽孢数为指标,研究5种农药对多粘类芽孢杆菌的活性影响。再次,通过质谱分析研究其降解产物特性,探讨降解产物的安全性。最后,通过田间试验验证多粘类芽孢杆菌降解5种农药的实际效果,同时,探讨了多粘类芽孢杆菌降解农药的同时在人参根部、人参茎叶、根部土壤定殖动态规律。具体结果如下:1.本文建立了同时测定人参茎叶及人参根中氟啶胺,BHC,PCNB,毒死蜱,DDT含量的方法(GC),样品采用正己烷提取,Florisil固相萃取柱净化,定量限为0.01μg/mL,线性关系良好(r≥0.9901)本方法精密度、最低检测限、加样回收率等考察指标的范围均符合相关标准,5种人参农药分离完全,适合人参中5种农药残留的同时检测。2.采用GC测定5种农药在人参内生多粘类芽孢杆菌作用下的降解动态,得到人参内生多粘类芽孢杆菌接种7d后对培养基中的氟啶胺、BHC、PCNB、毒死蜱、DDT降解率分别为94.77%、70.34%、77.92%、78.30%、66.70%,证明人参内生多粘类芽孢杆菌可同时降解5种农药(P<0.05);而5种农药氟啶胺、BHC、PCNB、毒死蜱、DDT对人参内生多粘类芽孢杆菌生长并无显著影响(P>0.05)。3.采用MS测定人参内生多粘类芽孢杆菌对培养基中5种农药的具体降解产物,结果表明,降解7d后,其主要降解产物为烷烃类,无毒且对环境不会造成二次污染,人参内生多粘类芽孢杆菌是理想的用于降解人参中这5种农药的益生菌。4.田间验证试验表明:多粘类芽孢杆菌对氟啶胺、BHC、PCNB、毒死蜱和DDT降解率:在人参采收期的人参根中分别为66.07%、46.24%、21.05%、72.40%和54.21%,在人参茎叶中分别为74.18%、55.61%、73.65%、58.13%和46.91%(P<0.05)。人参内生多粘类芽孢杆菌对田间栽培人参农药降解的同时,对人参根、茎叶的皂苷含量均有促进作用,喷施5次时人参根、人参茎叶中20种人参皂苷加和值最高,分别为1.5490%和8.7545%(P<0.05);对人参的生长势也呈正相关,喷施5次时效果最好:总株数308株/小区,结果率95%,地上病情指数4.12%,地下病情指数11.14%,单株茎叶鲜重8.2816 g,单株根鲜重13.1170 g(P<0.05)。人参内生多粘类芽孢杆菌降解5种农药的同时,农药并不影响该菌在人参根部、人参茎叶和根际土壤定殖(P<0.05)。
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