前胃泌素释放肽酶联免疫检测方法的初步建立

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前胃泌素释放肽酶联免疫检测方法初步建立摘要前胃泌素释放肽作为一种灵敏、特异的肿瘤标志物,对小细胞肺癌的早期诊断、疗效观察及预后具有重要意义.该文以人工合成前胃泌素释放肽(42~53)多肽为抗原免疫白兔,制备出兔抗前胃泌素释放肽多抗,抗血清效价为3×10<3>;用人工合成前胃泌素释放肽(68-82)多肽免疫小鼠,将其脾脏细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,经选择性培养筛选、克隆化培养、扩大培养等步骤,获得一株分泌抗前胃泌素释放肽单克隆抗体的杂交瘤细胞2D<,10>;经间接ELISA法检测2D<,10>分泌的单抗为IgG<,1>亚型,腹水效价为2×10<5>.用羟基磷灰石柱层析法纯化单抗腹水,并对纯化产物进行免疫活性和纯度鉴定;使用兔抗前胃泌素释放肽(42~53)多抗及抗前胃泌素释放肽(68~82)单抗,初步建立前胃泌素释放肽酶联免疫检测方法,检测33例小细胞肺癌患者、33例健康对照者以及20例小细胞肺癌患者治疗前后血清中前胃泌素释放肽水平,结果显示小细胞肺癌组光密度值(OD)显著高于对照组(P<0.001),小细胞肺癌患者经治疗后病情缓解者OD值有下降趋势(P<0.10).结果表明,该文建立的前胃泌素释放肽ELISA检测方法在小细胞肺癌的诊断及疗效观察方面有一定的参考价值.
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