水稻WRKY63基因的克隆及水稻PR1基因诱导表达的研究

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WRKY类蛋白是广泛存在于植物中的一类转录因子,参与植物对病原物的防卫反应、非生物胁迫以及某些生长发育的生理过程。本研究利用筛库的方法,从稻瘟菌激发子处理的水稻悬浮细胞的基因文库中分离了全长的WRKY63基因。这个基因是WRKY家族转录因子中的新成员,它被推测编码含有435氨基酸的蛋白质。利用农杆菌介导的方法,将该基因超表达后转入烟草,得到转基因植株30个株系。 病程相关蛋白(PR蛋白)是植物在防卫反应过程中诱导产生的一类蛋白,在植物的抗病抗逆过程中发挥重要作用。本研究利用PCR的方法克隆了水稻PRl基因的启动子,并且将该启动子与GUS报告基因相连,通过农杆菌的介导转入烟草,得到转基因植株28个株系。利用WRKY89和WRKY63转录因子诱导、机械损伤、紫外照射,植物激素等因素处理转基因烟草,发现这些因素均不能诱导PRl基因启动子活性发生显著变化。结果表明两种WRKY蛋白不能调节PRl基因在烟草中的表达;PRl基因的表达也不受机械损伤、紫外照射和植物激素等非生物因素的诱导。
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