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良性前列腺增生(BPH)是老年男性常见的一种疾病,60岁以上的人群当中,有70%以上的人患此疾病,并可导致许多症状和并发症。目前良性前列腺增生的病因仍不十分清楚。前列腺癌(Pca)是欧美男性发病率占第二位的恶性肿瘤,在我国的发病增长率已居泌尿生殖系恶性肿瘤之首。前列腺癌具有潜伏性,发病率高的特点,我国70岁以上人群中,高达25%的人患有前列腺癌,但发展为临床癌者仅占极小部分。在治疗方法上,化疗药物难以进入前列腺癌组织,而且前列腺癌出现临床症状时多已发生转移,手术治疗效果差。目前的内分泌治疗虽可改善患者症状,减轻病人痛苦,但不能延长生存时间,因而迫切需要治疗前列腺癌的新方法。前列腺癌的生长受多种多肽生长因子调控,其中包括碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF),它是一种重要的促血管生长因子和细胞有丝分裂促进因子,在前列腺细胞生长、增殖、分化及血管形成中具有重要作用。目前一些碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)抑制剂已经应用于前列腺癌和前列腺增生的治疗,并取得良好的效果。本实验应用RNA斑点杂交技术和免疫组织化学的方法检测正常前列腺(NP)、良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(Pca)组织中碱性成纤维第四军医大学硕士学位论文细胞生长因子(b一FGF)的表达,旨在探讨其在良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(Pca)中的可能作用,能否成为一种前列腺癌的新的肿瘤标记物。 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)在正常前列腺(NP)、良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(Pca)组织中的表达及其与良性前列腺增生(BPH)的临床分度、(Pca)的临床分期及病理分级的关系,旨在探讨b一FGF能否成为一种新的前列腺癌的肿瘤标记物,为进一步的药物治疗实验奠定基础。 方法:对30例正常前列腺(NP)、58例良性前列腺增生(BPH)和56例前列腺癌(Pca)组织进行碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)质粒的转化、扩增及提取,所得碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)质粒经EcoRI和价儿dll酶切回收探针片段,探针的标记采用荧光素标记试剂盒随机引物法,采用异硫氰酸肌一步法提取细胞总RNA,以相同浓度的总RNA点膜进行RNA斑点杂交,采用试剂盒发光自显影法检测,显影胶片应用计算机图像分析技术测定斑点平均吸光度值。 采用LSAB法进行免疫组化染色测定正常前列腺(NP)、良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(Pca)组织中碱性成纤维细胞生长因子 (b一FGF)的分布及表达情况。 结果: 1.RNA斑点杂交结果:正常前列腺组织中碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)mRNA表达弱,良性前列腺增生和前列腺癌组织中均表达碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)mRNA,并与正常前列腺组织之间有显著差别(P<0.01),前列腺癌组织和良性前列腺增生组织之间有显著差别(P<0.05)。方差分析I、11、m、W度的前列腺增生组织中碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)mRNA的表达组间无明显差异。A、B、 一4·第四军医大学硕士学位论文C、D期前列腺癌组织中碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)mRNA经方差分析表达无明显差异。高、中、低分化前列腺癌组织中,碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF) mRNA经方差分析各组间b一FGF ml刃NA的表达无明显差异。 2.免疫组织化学结果:30例正常前列腺(NP)组织中,碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)呈弱阳性,阳性表达率为1 0.0%(3/30),阳性染色主要位于间质细胞浆。前列腺增生(BPH)组织中,阳性表达率为67.2%〔39/58),与正常前列腺(NP)组织相比较,差异显著(P<0.01),良性前列腺增生(BPH)病例中,阳性染色主要位于腺上皮细胞浆和间质细胞浆。前列腺癌(Pca)组织中b一FGF的表达率为86.2% (50/56),阳性染色位于癌细胞胞浆,与正常前列腺(NP)组织相比较,差异显著(尸<0.01),与良性前列腺增生(BPH)组织相比较,差异显著(p<0.05)。秩和检验表明,b一FGF的染色强度与前列腺癌的病理分级、临床分期及良性前列腺增生的分度均无明显关系(尸>0.05)。 结论:碱性成纤维细胞生长因子(b一FGF)与前列腺癌的病理分级、临床分期及良性前列腺增生的临床分度均无明显关系;b一FGF可能成为一种新的前列腺癌的肿瘤标记物:为进一步的实验及探索治疗前列腺癌、良性前列腺增生的新方法奠定了基础。