鸡滑液囊支原体的分离鉴定及部分生物学特性研究

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鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)可引起鸡滑液囊炎,该病是鸡的一种急性或慢性传染病,以侵害关节的滑液囊膜及腱鞘为主,引起关节渗出性滑膜炎、腱鞘炎及跗关节和脚垫肿胀。鸡群感染该病可导致明显的跛行,生长发育迟缓及酮体降级等,并且与呼吸道疾病有关。与鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)一样,鸡滑液囊支原体感染已遍及全球。在我国,无论是商品肉鸡、蛋鸡或种鸡,MS感染均有发生,给养鸡业造成巨大的经济损失。本研究通过鸡滑液囊支原体的分离鉴定、生长特性、人工感染试验、免疫抗体水平的测定等方面的试验,结果如下:(1)鸡滑液囊支原体的分离与鉴定:2012年通过对河南、江苏、广东等省鸡场疑似MS感染的病鸡,无菌采集肿胀跗关节腔内的关节液及内容物进行鸡滑液囊支原体的分离鉴定。从采集的102份有腿瘫症状病鸡的肿胀爪垫或附关节内容物中分离出10株鸡滑液囊支原体,分离率为7.14%~14.29%,平均分离率9.8%。本试验结合菌落形态、染色镜检、红细胞吸附、L型细菌鉴定、生化试验、血清学试验、分离菌株vlhA基因的克隆及序列分析、人工感染试验等,确诊本次分离的菌株为鸡滑液囊支原体。4株(HNO1、JSO1、JS02、GD01)分离菌株的药物敏感试验结果表明:鸡滑液囊支原体对泰乐菌素、百里霉素高度敏感,而对林壮合剂、盐酸林可霉素和罗红霉素具有明显的抵抗力。(2)鸡滑液囊支原体的生物学特性:分离株生长过程中的CCU的变化范围为3-9CCU/ml,在36h~40h之间达到Ms的生长高峰期,培养滴度可达109CCU/ml.分离菌株培养液在-70℃保存期可达1个月以上,-20℃保存7d,-4℃保存2d,25℃条件下只能存放1d。若在Ms中加入30%灭菌甘油,在-20℃保存期达21天,-70℃保存期至少12个月。鸡滑液囊支原体攻毒模型的建立,4株(HN01、JSO1、JS02、GD01)分离菌株分别爪垫接种SPF鸡,都能引起鸡只发生典型的MS临床症状及病理变化,并且能从感染的鸡只中再次分离到MS。经静脉注射途径也可以复制出典型的MS临床病例,但发病率低于爪垫注射组。免疫抗体水平的测定试验结果表明:采用MS分离菌株(HN01株)制备的灭活疫苗免疫后14天抗体水平迅速升高,免疫后21天,S/P值均大于0.5,判定为阳性,免疫鸡抗体水平显著高于对照鸡,说明Ms分离菌株(HN01株)具有良好的免疫原性。
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