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本试验通过对三头黄牛进行体外模拟胆囊内培植牛黄手术,并从其胆囊中获得引流胆汁,从屠宰场无菌获得屠宰胆汁。利用引流胆汁和屠宰胆汁的混合物在实验室条件下进行育黄。本文通过体外牛黄发生器内成黄实验探讨了不同的反应温度、添加不同浓度的Ca2+、Mg2+、胆红素钠、粘蛋白对体外牛黄及胆汁中胆红素、胆酸、粘蛋白、Ca2+等主要成分含量的影响,结果表明:温度升高有利于胆红素钙的沉淀, 55℃为成黄最佳反应温度。胆汁在牛黄发生器中反应约20小时后,颜色由反应前的草绿色变为橙黄色,胆汁黏度和PH值呈下降趋势。利用超声波将大肠杆菌(E.coli)菌体打碎,从中获取β-G酶粗制品,在55℃反应条件下,每次用2500毫升胆汁,以40滴/分的速度进行滴流,取得如下实验结果: (1) 向牛黄发生器中加入不同浓度的Ca2+能明显提高胆汁中胆红素的沉淀量(P<0.01);以5mg/dlCa2+对游离胆红素(UCB)的沉淀效果最为理想。(2) 加入不同浓度的Mg2+对体外牛黄的产量和质量无明显影响(P>0.05),且反应后胆汁中各成分变化不显著(P>0.05)。(3) 同时加入Ca2+、Mg2+,明显地加快胆汁中胆红素沉淀(P<0.01),反应后胆汁中胆红素、Ca2+、粘蛋白的浓度下降明显(P<0.01),而胆酸、Mg2+、胆汁PH值下降差异不显著(P>0.05)。(4) 加入不同浓度的胆红素钠,能明显提高胆汁中胆红素的转化率,反应后发生器中的Ca2+、粘蛋白也呈下降趋势,其它成分变化不显著(P>0.05)。(5) Ca2+、Mg2+浓度均为15mg/dl时,加入胆红素钠的浓度越高,生成体外牛黄的量反而越少。反应后胆汁中的胆红素、粘蛋白、Ca2+下降明显(P<0.01)。(6) Ca2+、Mg2+浓度均为15mg/dl时,加入不同浓度的粘蛋白,随着粘蛋白浓度的升高,胆汁中的胆红素、Ca2+及粘蛋白的含量有显著变化(P<0.05),但是当超过一定的浓度以后,其变化不明显(P>0.05);胆汁中胆酸、Mg2+及PH值变化不显著(P>0.05)。 <WP=7>本研究共得到体外牛黄30.290克,其中10.183克体外牛黄的胆红素含量超过35%,占总量的33%,体外牛黄的产量为3.029g/10000mL胆汁。利用体外牛黄、天然牛黄和牛胆囊内培植牛黄做药理试验,结果表明本实验得到的体外牛黄有与天然牛黄相似的药理作用,能对2,4-二硝基酚所致的大鼠发热反应有显著的对抗作用;并能降低家兔的正常血压。