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氨氮污染是现代水产养殖中常遇到的应激源,冬眠是龟鳖在低温环境下的自然习性,维生素C在提高动物抗应激能力和免疫功能方面具有重要作用。本研究主要分为两个部分:(1)探讨了冬眠过程中,外源Vc及氨氮胁迫对中华鳖稚鳖生理特性的影响;(2)分析了外源Vc及冬眠对乌龟幼龟生理特性的影响。主要研究结果如下:
1.在水温28℃下,用含0mgg、500mg/kg、2500mg/kg的饲料投喂中华鳖稚鳖(27.51±4.23g)4周,然后缓慢降温至10℃使鳖进入冬眠,冬眠过程中各实验组的中华鳖随机分为两部分,分别施加100mg/L(a)、150(b)mg/LTAN的氨氮胁迫,对照组饲喂基础料,也进入冬眠,但不施加氨氮胁迫。在入眠前、冬眠6周和出眠三个时刻取样。结果在本实验范围内表明:入眠前,Vc0组血清渗透压显著高于Vc添加组,冬眠期间,各组均显著降低P<0.05);入眠前,不同Vc水平组间脾脏系数无显著差异(F3,27=2.132,P=0.120),冬眠期间,对照组显著高于各实验组(P<0.05);入眠前,Vc2500组血清溶菌活力显著低于其他三组(F3,30=3.546,P=0.026),冬眠期间,Vc添加组略低于对照组和Vc0组;入眠前,随Vc水平升高,GPT(谷丙转氨酶)活力呈上升趋势,出眠时,Vc添加组显著降低(P<0.001);入眠前,Vc2500组GOT(谷草转氨酶)活力显著高于对照组和Vc0组(F2,21=6.313,P=0.007),冬眠期间,各实验组显著高于对照组(P<0.001);入眠前,不同Vc水平组间AKP(碱性磷酸酶)活力差异显著(F2,23=9.225,P=0.001),冬眠期间和出眠时各组AKP活力呈下降趋势;入眠前,随Vc水平升高,MDA(丙二醛)呈上升趋势,冬眠期间和出眠时,Vc添加组低于对照组和Vc0组;冬眠期间,对照组和Vc添加组SOD(超氧化物歧化酶)活力显著降低(P<0.001),出眠时,Vc添加组显著高于Vc0组(P<0.001);冬眠期间,各组总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05)。结果表明,中华鳖有较强的耐受水体中氨氮胁迫的能力,外源Vc能够调节冬眠和氨氮对中华鳖生理特性的影响。
2.在水温28℃下,用含0mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg和2500mg/kg的饲料投喂乌龟幼龟(88.9±2.45g)4周,然后缓慢降温至10℃使龟进入冬眠,对照组始终在28℃饲喂基础料。在入眠前、冬眠4周、6周和出眠四个时刻取样。结果在本实验范围内表明:血清渗透压、血红蛋白含量和血细胞比积不受饲料Vc添加水平的影响,冬眠期间,各组血清渗透压均显著下降(P<0.05),各组血红蛋白含量在冬眠期间呈现先下降后上升的趋势(P<0.001),冬眠期间,各组血细胞比积无显著性的变化。
冬眠期间,除Vc100和Vc500组外,各实验组白球蛋白比均显著降低(P<0.001);冬眠期间,各组血清尿酸含量均显著上升(P<0.001);实验期间,各组血糖含量呈现先降低后升高的趋势(P<0.05);外源Vc对血清中GPT和GOT活力影响不显著,冬眠期间,各组中两种酶活力均有所降低。血清中CK(肌酸激酶)和LDH(乳酸脱氢酶)活力非常高(分别为2194IU/L和374IU/L),外源Vc对其没有显著影响,冬眠对其影响显著。冬眠期间和出眠时,各实验组AKP(碱性磷酸酶)活力均显著降低(P<0.05)。
外源Vc对乌龟脾脏系数和血清溶菌活力影响不显著,冬眠期间,除Vc500和Vc2500组外,各实验组血清溶菌活力均有所降低;入眠前,随着Vc水平的提高,SOD活力和T-AOC都有升高的趋势,在冬眠期间,Vc低剂量组(Vc0、Vc100、Vc200)的肝脏中SOD活力和T-AOC(总抗氧化能力)显著升高(P<0.05),而Vc高剂量组(Vc500、Vc2500)保持不变或略有下降;入眠前,随Vc水平提高,肝脏中MDA(丙二醛)含量呈现先下降后上升的趋势,最低值为Vc100组,冬眠4周后,Vc高剂量组(Vc2500)肝脏MDA含量显著下降(P<0.05)。结果表明:外源Vc对乌龟的血液生理指标和非特异性免疫功能影响不显著,正常养殖过程中低剂量的Vc有利于提高乌龟的抗氧化能力,而高剂量的Vc反而表现出一定的副作用。在乌龟冬眠期间,高剂量的Vc添加对于提高乌龟的抗氧化能力有更大的作用。