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本论文通过“体内”(invivo)和“体外”(invitro)试验，研究了外源核苷酸混合物(nucleotide mixture，mix-NT)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾生长性能、全虾体成分、血清生化指标、肝胰腺和肠道总蛋白及RNA含量、肠道形态、非特异性免疫功能和抗病能力的影响；以及对原代培养肝胰腺细胞生化和非特异性免疫指标的作用。本论文包括以下三个部分：
1、饲料中添加核苷酸对凡纳滨对虾幼虾生长性能、组织生化组成、肠道形态和非特异性免疫功能的影响
选取960尾初始体重为(0.43±0.01)g的凡纳滨对虾，随机分为8组，分别投喂基础饲料和7种添加mix-NT(5-腺苷酸：5-胞苷酸：5-尿苷酸二钠：5-肌苷酸二钠：5-鸟苷酸二钠=1：1：1：1：1)的试验饲料，添加量分别为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2 g/kg饲料，进行5周的养殖试验。试验结果显示：
(1)0.4 g/kg组的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和摄食量(FI)显著高于对照组(P＜0.05)。0.6和1.0 g/kg组的蛋白质沉积率(PDR)显著高于对照组(P＜0.05)。饲料mix-NT对对虾饲料系数(FC)、存活率(SR)和肝胰指数(HSI)影响不显著(P＞0.05)。mix-NT显著升高全虾粗脂肪、灰分含量(P＜0.05)，对全虾干物质和粗蛋白含量有升高作用，但差异未达到显著水平(P＞0.05)。
(2)饲料mix-NT显著降低凡纳滨对虾血清尿酸(UA)含量(P＜0.05)，但对谷丙转氨酶(GTP)活力和总蛋白(TP)、高密度脂蛋白(HDL)含量无显著影响(P＞0.05)。1.2 g/kg组的血清谷草转氨酶(GOP)活力显著升高(P＜0.05)。0.2～1.0 g/kg组的肝胰腺RNA量显著高于对照组(P＜0.05)；各mix-NT添加组的肠道TP含量均显著高于对照组(P＜0.05)，0.4和0.6 g/kg组的肠道RNA量极显著高于对照组(P＜0.01)。
(3) mix-NT添加量为0.1～0.8 g/kg组的肠壁厚度显著高于其它组(P＜0.05)，各组肠绒毛高度差异不显著(P＞0.05)。
(4)饲料mix-NT显著提高对虾血细胞总数(THC)、血清超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(LZM)活力(P＜0.05)。0.4 g/kg组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于1.2 g/kg组(P＜0.05)。肝胰腺T-AOC、SOD和LZM活力均随mix-NT添加量的增加而显著升高(P＜0.05)。0.1～0.6 g/kg组的鳃酚氧化酶(PO)活力显著高于对照组(P＜0.05)。添加mix-NT显著显著降低肝胰腺丙二醛(MDA)含量(P＜0.05)。0.2～0.6 g/kg组的肌肉抗超氧阴离子自由基(anti-O2-)活力显著高于1.0和1.2 g/kg组(P＜0.05)。
2、饲料中添加核苷酸对凡纳滨对虾抗白斑综合症病毒(WSSV)感染能力的影响
选取初始体重为(1.01±0.02)g的凡纳滨对虾，随机分为8组，按照上述试验处理进行7周的饲养试验。养殖结束后，进行攻毒试验，攻毒后继续饲养72h后，分析对虾的累计死亡率(AMR)、相对免疫保护率(RPS)、存活虾血清和肝胰腺非特异免疫指标的变化。结果显示：
(1)0.1、0.4、0.6和0.8 g/kg组的AMR显著低于0、1.0和1.2 g/kg组(P＜0.05)。0.1～0.8 g/kg组的RPS比对照组提高28％～36%。
(2)与对照组相比，mix-NT添加组血清抗菌活力和肝胰腺PO活力显著升高(P＜0.05)，肝胰腺MDA含量显著降低(P＜0.05)。人工注射WSSV72 h后，对虾THC、血清抗菌活力、T-AOC、POD活力和肝胰腺TP含量、SOD活力均低于攻毒对照组，而肝胰腺PO活力和MDA含量高于攻毒对照组。攻毒后，0.4和0.6 g/kg组对虾THC，0.1、0.2、0.4和0.8 g/kg组血清抗菌活力，0.4 g/kg组T-AOC和0.2～1.0 g/kg组肝胰腺SOD活力显著高于未添加组(P＜0.05)。
3、外源核苷酸对原代培养凡纳滨对虾肝胰腺细胞生化和非特异性免疫指标的影响
用含有不同浓度(0、0.05、0.20、0.40、0.60、1.0 g/L) mix-NT的培养基对凡纳滨对虾肝胰腺细胞进行原代培养，24 h后测定细胞匀浆上清液中的生化和非特异性免疫相关指标。试验结果显示：
(1)随着mix-NT浓度的增加，RNA/DNA比呈现先增加后降低的趋势，1.0 g/L组显著低于0.05～0.4 g/L组(P＜0.05)。0.4 g/L组细胞GOT活力显著低于1.0 g/L组(P＜0.05)。UA含量随mix-NT添加量的升高而显著升高(P＜0.05)。
(2) SOD、PO和AKP活力均随mix-NT浓度的增加而显著升高(P＜0.05)，当mix-NT添加量超过0.4 g/L时，各酶的活力均不同程度下降。添加mix-NT显著降低MDA含量(P＜0.05)。
综上所述，饲料中添加适量的核苷酸混合物能够显著改善凡纳滨对虾幼虾的生长性能，改善肝胰腺功能和肠道形态，提高非特异性免疫功能和抗WSSV感染的能力，促进原代培养培养肝胰腺细胞的生长和提高非特异性免疫能力。