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目的： 1.观察肠癌中VM的存在，并探讨其形成的主要机制，主要研究细胞微环境、VE-Cd、MMP-2、MMP-9在VM形成中的影响； 2.研究NCTD对肠癌VM形成的影响及主要机制。 方法： 1.6种人结肠癌细胞株HCT116、HCT8、CT26、HT29、LOVO和LS174T，体外经普通二维和三维培养后，观察VM的形成情况，RT-PCR检测各组细胞VE-CdmRNA的表达，同时用Western Blotting法检测各组细胞膜和细胞浆中VE-Cd蛋白的表达水平，再用明胶酶谱法检测各组细胞MMP-2、9的活性； 2.分别观察VE-Cd siRNA以及TIMP-2对能稳定形成VM的肠癌细胞VM形成、VE-Cd蛋白表达以及MMP-2和MMP-9活性的影响； 3.MTT法检测NCTD体外作用于HCT116细胞48小时的剂量--抑制率曲线，计算IC10值作为无毒剂量的上限； 4.NCTD取无毒剂量以下7.5、15、30μmol/L三个浓度，作用于三维培养的HCT116细胞，观察其对HCT116细胞VM形成、VE-Cd蛋白表达、MMP-2和MMP-9活性的影响； 5.建立HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤模型，予2、5、8mg/kg三个剂量的NCTD腹腔注射1个月，另设空白对照和5-FU阳性对照组，观察其对裸鼠和瘤体生长的影响。给药结束后，称量裸鼠带瘤体重和瘤重，计量抑制率。再将瘤体做CD31免疫组化和PAS双重染色，观察各组瘤体内VM的多寡以及VE-Cd、MMP-2和MMP-9的表达水平。 结果： 1.在普通二维培养条件下，6种细胞均不能形成VM结构；而在三维培养条件下，HCT116、HCT8、CT26这三种细胞可稳定形成VM结构，LOVO次之，HT29、LS174T则不能形成VM结构。各组细胞中VE-CdmRNA差异不大，但蛋白表达存在差异，尤其是细胞膜上的VE-Cd蛋白，在VM阳性的HCT116、HCT8、CT26三种细胞中被高表达，和VM阴性的HT29、LS174T和LOVO细胞之间的差异有统计学意义(p<0.05)。HCT116、HCT8、CT26三组的MMP-2和MMP-9活性高于HT29、LS174T和LOVO三种细胞。 2.HCT116、HCT8、CT26经小RNA干扰和无毒剂量下NCID作用后，VE-CdmRNA和蛋白被显著下调(p<0.01)，MMP-2和MMP-9活性受到抑制，形成VM结构的能力变弱，NCTD干预各组存在剂量依赖。TIMP-2对肠癌细胞VM形成和MMP-2和MMP-9的活性存在影响，但不影响VE-Cd的表达。 3.动物实验观察到，HCT116细胞接种裸鼠皮下后，2周形成肉眼可见的小瘤体。经不同剂量的NCTD作用1个月后，裸鼠生存良好，而瘤体生长被抑制。CD31免疫组化和PAS双重染色可以观察到CD31阴性且PAS阳性由肿瘤细胞围成的管道，部分管道内可见红细胞存留。跟空白组相比，给药各组管道数量明显减少。免疫组化提示，NCTD组中VE-Cd、MMP-2和MMP-9的表达受到抑制，低于空白对照组。 结论： 肠癌中存在VM结构，不同肠癌细胞形成VM结构的能力不同。肠癌细胞所处的微环境是VM形成的原因之一。VE-Cd、MMP-9和MMP-2在肠癌VM形成过程中起重要作用，其中细胞膜上的VE-Cd蛋白是关键，VE-Cd在MMP-2和9上游，对其有调控作用；NCTD可以抑制肠癌VM的形成，其机制跟影响VE-Cd、MMP-2和9的表达有关。