论文部分内容阅读
目的：近年来Ⅱ型糖尿病的发病机理已经研究得较为透彻,其为遗传和环境因素共同作用而形成的多基因遗传性复杂疾病。目前的研究多集中于胰岛素抵抗和p细胞分泌缺陷是Ⅱ型糖尿病发病机制的两个主要环节,肠道微生态系统因其本身的复杂性而少有涉及,利用乳酸菌预防与治疗Ⅱ型糖尿病更鲜见于报道。本实验观察糖尿病易感小鼠及患病小鼠的病情以及肠道菌群变化情况,探讨二者之间的联系,为预防与治疗Ⅱ型糖尿病提供实验依据。方法：以昆明系小鼠为同系对照,将昆明系小鼠分为L组,M组,H组,Y组,CON组,DM组。L组、M组、H组、DM组采用抗生素进行小鼠腹腔注射,以链脲佐菌素(STZ)终浓度80mg/kg/d的剂量,连续5天,通过干扰胰岛β细胞构建Ⅱ型糖尿病小鼠模型；Y组以乳酸杆菌活菌制剂终浓度20亿单位／日的剂量灌胃,连续7天后,以链脲佐菌素终浓度80mg/kg/d的剂量,连续5天,建立对Ⅱ型糖尿病预防的小鼠模型CON组仅每日予以标准饲料。造模成功(空腹血糖≥11.1mmol/L)后,L组每日灌胃0.5亿单位嗜酸乳杆菌活菌制剂,M组Y组每日灌胃20亿单位嗜酸乳杆菌活菌制剂,H组每日灌胃200亿单位乳酸杆菌活菌制剂,DM组与CON组每日灌胃生理盐水0.2ml。观察至造模后25天各组的体重、空腹血糖、C肽水平、血脂谱、胰腺组织学、肠道菌群变化情况。结果：1.腹腔注射STZ后,Y组发病率80%,明显低于其他各组100%,发病时间也显著延缓,胰岛炎症程度明显减轻。2.造模成功小鼠血糖升高时,DM组、L组、D组小鼠体重减轻明显,H组、Y组小鼠体重有所减轻；C肽水平低于正常水平；肠道益生菌(双歧杆菌,乳酸杆菌)的数量降低；灌胃嗜酸乳杆活菌制剂后,小鼠血糖降低,小鼠体重恢复至正常,C肽水平有所回升,肠道益生菌的数量有所恢复。但是某些条件致病菌,如大肠杆菌、葡萄球菌在整个实验里呈递增状态。3.小鼠血浆TG、TC、LDL、HDL测定结果显示：STZ诱导Ⅱ型糖尿病后,小鼠TG、LDL升高,而TC与HDL变化不明显。灌胃后25d后,各组小鼠升高的TG、LDL均有不同程度的回落,Y组小鼠恢复至正常水平。4.小鼠胰岛病理结构变化：光镜下观察,CON组小鼠胰岛与外分泌腺之间周界清楚,胰岛表面有一层菲薄的纤维膜包裹,形态规则,胰岛内细胞排列整齐,大小一致分布规则,细胞核呈蓝色着染,大而圆,核清晰,核仁明显,胞质丰富浅粉色着染；DM组胰岛萎缩,为增生的纤维细胞分割,或玻璃样变,B细胞减少,细胞大小不一,胰岛细胞增生,一侧可见多数小血管,可见凋亡细胞：L、M、H组胰岛数及岛内细胞数较DM组为多,形态较为规则,少部分核固缩,部分细胞空泡变性；Y组胰岛细胞形态接近CON组,边界较清楚,细胞排列较整齐,胰岛数及岛内细胞数多于L、M、H组,细胞分布均匀,核大小基本相等,少部分核固缩。结论：嗜酸乳杆菌对STZ所致Ⅱ型糖尿病小鼠胰岛结构和功能的损伤具有保护作用；STZ建立Ⅱ型糖尿病模型小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌的变化趋势与血糖变化呈负相关,肠杆菌、葡萄球菌与血糖变化的规律不明显。