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目的探讨超容量负荷联合压力负荷制备家兔心衰模型的可行性,在家兔心衰心肌细胞研究钙循环异常的细胞学基础,并观察美托洛尔和氯沙坦对钙调控蛋白表达和活性的影响,从而更深入的了解心衰的分子机制。方法(1)实验分组:38只家兔随机分为四组:假手术组(n=11)、心衰组(n=11)、美托洛尔干预组(n=8, 5mg Bid)和氯沙坦干预组(n=8, 10mg qd);(2)心衰模型的建立:心衰组和心衰干预组家兔先诱导主动脉瓣关闭不全,2周后缩窄腹主动脉,利用心脏多谱勒观察术前后家兔心脏结构和功能的变化,共观察6周;(3)钙调控蛋白活性的测定:采用常规酶解法分离心室肌细胞,Fluo-3/AM负载心肌细胞,利用激光共聚焦显微技术,观察咖啡因诱导的钙瞬变过程中细胞内钙浓度的动态变化,了解钙释放通道(RyR2)、肌浆网钙泵(SERCA2a)和钠钙交换体(NCX)的活性;(4)钙调控蛋白表达的测定:从左室心肌组织提取膜蛋白后,采用Western blot法测定钙调控蛋白表达水平,并应用UVIDoc成像仪进行蛋白表达半定量分析;(5)统计学分析:利用SPSS11.0统计软件进行数据处理,所有数据以x±s表示,多组间均数比较采用ANOVA方差分析以及两两均数比较采用LSD检验,率的比较采用χ2检验,P<0.05为统计学显著性差异。结果(1)心功能的比较:与假手术组相比,心衰组室间隔厚度(2.30±0.15mm vs. 1.82±0.12mm,p<0.01)、左室舒张末径(21.2±1.69mm vs. 14.1±1.56mm,p<0.001)、左室/体重比(3.4±0.5 vs. 1.1±0.07,p<0.01)明显增加,射血分数(EF)明显降低(45.7±3.00% vs.72.6±5.03%,p<0.001),而美托洛尔和氯沙坦干预组EF较心衰组均明显增加(美托洛尔干预组:60.2±5.13% vs. 45.7±3.00%, p<0.001;氯沙坦干预组:62.5±3.43% vs. 45.7±3.00%,p<0.001); (2)钙调控蛋白活性的比较:与假手术组相