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月季(Rosa chinensis),属于蔷薇属(Rosa),最早起源于中国,被称作花中皇后,而且月季是国内传统的十大名花之一和四大切花之一,具有很高的栽培和应用价值,在园林绿化中被广泛应用。本研究主要采用离体诱导的方式对‘月月粉’植株进行了四倍体诱导,并对诱导成功的植株进行鉴定和分析,主要研究结果如下:1、本研究利用不同浓度秋水仙素和不同时间浸泡茎尖的方式诱导‘月月粉’四倍体,并通过根尖染色体计数的方法对处理后的植株进行鉴定,发现作为对照的‘月月粉’植株细胞核内染色体个数为2n=2x=14,诱导成功的四倍体植株细胞核内的染色体数为2n=4x=28。结果显示:诱导浓度为4g/L的秋水仙素处理48h时的诱导效果最佳,该处理条件下的致死率为46.67%,四倍体诱变率为16.67%。2、选取定植后生长60 d的四倍体和二倍体植株对比发现叶片及气孔相关指标差异显著。①四倍体植株保卫细胞长度为37.6μm,二倍体植株的保卫细胞长度为26.9μm,四倍体植株的保卫细胞长度显著长于二倍体植株;四倍体植株的气孔内叶绿体数为24.2个,二倍体植株的气孔内叶绿体数为13.5个;相反,四倍体植株的10×40视野下气孔数为10.9个,低于二倍体植株的15.4个。②同时,四倍体植株的叶宽变化明显,叶宽为2.896cm,而二倍体植株仅为2.071 cm;相比于叶片宽度而言,叶片长度则增加幅度较小,四倍体植株的叶片长度为4.915 cm,而二倍体植株的叶片长度为4.294 cm。四倍体植株叶片叶型指数(叶长/叶宽)为1.697,相对于二倍体的2.109有所降低;就叶片外形来看,四倍体植株接近于椭圆形,二倍体植株叶型较为瘦长。③四倍体植株10层叶片厚度为0.392 cm,二倍体植株10层叶片厚度则为0.304 cm。④通过DUS测试发现,四倍体植株的叶片、萼片等特征发生改变,与二倍体植株相比具有特异性。3、对比抗氧化酶活性发现四倍体植株显著高于二倍体植株,四倍体植株的SOD(超氧化物歧化酶)活性为200.2U/g FW,二倍体植株的活性为156.6U/g FW;四倍体植株的POD(过氧化物酶)活性为140.3 U/g FW,二倍体植株的活性为81.4 U/g FW,暗示四倍体植株抗逆性优于二倍体植株。采用位于7条染色体上的17对SSR分子标记位点引物对‘月月粉’二倍体和四倍体植株进行PCR扩增,结果发现二倍体和四倍体植株的各位点条带完全相同,表明诱导后植株的形态、生理生化指标的变化均为染色体加倍所致,诱导后的四倍体植株确定为供试古老月季品种‘月月粉’的同源四倍体植株。4、试验得出适合四倍体‘月月粉’不定芽增殖的培养基配方为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.07 mg/LNAA+30 g/L Glu+6.5 g/L Agar,该处理的不定芽增殖倍数为处理中最高,为3.30。