论文部分内容阅读
目的：蜱隶属节肢动物门Arthropoda、蛛形纲Arachnida、蜱螨亚纲Acari、寄螨总目Parasitiformes、蜱目Ixodoida，是一类在哺乳动物、爬行类、鸟类和两栖类等脊椎动物的体表寄生的吸血节肢动物，是多种自然疫源性疫病病原体的传播媒介兼贮存宿主。除了作为疫病传播媒介，蜱类可通过直接叮咬对宿主造成伤害，对全球畜牧业发展造成很大影响。蜱类研究具有非常重大的兽医学、医学及经济学意义。准噶尔盆地是我国第2大盆地，地处新疆北部，是我国虫媒疫病的自然疫源地。但是至今对于该地区进行系统全面的蜱类调查尚未见报道；而对准噶尔盆地硬蜱进行分类学研究是解析该地区蜱类种群分布的基础，研究结果将可为蜱及蜱传疾病的防控提供理论依据。方法：(1)根据地理生态区划在准噶尔盆地各生态点进行硬蜱采集。(2)依据经典蜱类形态学种属检索资料对蜱标本进行形态学种属鉴定。(3)选取亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱、草原革蜱和森林革蜱3对相似种的雄性虫体，进行分子比对分析。具体方法包括：分别提取上述6种蜱的基因组DNA；根据GenBank上璃眼蜱属和革蜱属的rDNAITS2基因序列设计引物；应用分子克隆技术将6种蜱的基因片段进行克隆、测序；应用生物信息学分析软件对测序结果进行序列分析，并构建系统发育树。结果：(1)通过初步形态学鉴定，本实验在准噶尔盆地共采集硬蜱19466只，隶属5属21种，即全沟硬蜱Ixodes persulcatus，丹氏血蜱Haemaphysalis danieli、短垫血蜱Haemaphysaliseinaceituranica、刻点血蜱Haemaphysalis punctata、具沟血蜱Haemaphysalis sulcata，舒氏扇头蜱Rhipicephalus schulzei、血红扇头蜱Rhipicephalus sanguineus、图兰扇头蜱Rhipicephalus turanicus、短小扇头蜱Rhipicephalus pumilio，亚洲璃眼蜱Hyalomma asiaticum asiaticum、亚东璃眼蜱Hyalommaasiaticum kozlovi、残缘璃眼蜱Hyalomma detritum detritum、盾糙璃眼蜱Hyalomma scupense、小亚璃眼蜱Hyalommaanatolicum anatolicum、麻点璃眼蜱Hyalomma rufipes，银盾革蜱Dermacentor niveus、边缘革蜱Dermacentor marginatus、草原革蜱Dermacentor nuttalli、森林革蜱Dermacentor silvarum、阿坝革蜱Dermacentor abaensis、巴氏革蜱Dermacentor pavlovskyi。首次报道在新疆发现阿坝革蜱。(2)对亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱、草原革蜱和森林革蜱这3对蜱的ITS2序列进行了分析，结果显示：亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱的ITS2序列长度均为1458bp，全序列存在3个变异位点（A、G转换）和2个碱基缺失插入，同源性达99%；残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱的ITS2全长均为1561bp，存在12个变异位点，同源性达99%；草原革蜱和森林革蜱的ITS2全长分别为1111bp和1110bp，存在7个变异位点和1个碱基缺失插入。14种硬蜱的ITS2序列中C+G%含量较高，为61.2%~62.7%。系统进化分析表明亚洲璃眼蜱指名亚种和亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和盾糙璃眼蜱分别处在两个分支上，这两个分支分别与嗜驼璃眼蜱和小亚璃眼蜱聚为一支；草原革蜱和森林革蜱、银盾革蜱和边缘革蜱分别处在两个分支，并与璃眼蜱属和扇头蜱属聚为一大支，血蜱属单独构成一大支。结论：在准噶尔盆地采集硬蜱19466只，共5属21种，与文献记载的新疆硬蜱种类基本一致；草原革蜱、亚洲璃眼蜱指名亚种银盾革蜱和亚东璃眼蜱为该盆地的优势蜱种。通过3对形态相似种蜱的ITS2序列比较，结果表明ITS2可作为其遗传变异分子的分子标记，并为研究其系统发育和完善分类系统提供参考。