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我国猪血资源非常丰富,每年由屠宰生猪而产生的副产物猪血总量约15亿公斤,但是国内对猪血深加工或综合利用的研究进展缓慢,资源利用率低,既浪费了宝贵的生物资源又造成严重的环境污染。目前,利用不同蛋白资源开发功能多肽已成为研究热点,本文对猪血粉蛋白制备猪血活性肽进行了研究,并对其血管紧张素转化酶(ACE)抑制作用进行了探讨。对三株不同的枯草芽孢杆菌进行了透明圈实验和产蛋白酶活力比较,选用DC值较大和产酶能力较强的B3菌株以猪血粉为原料进行发酵。结果发酵后猪血粉的蛋白质含量下降了24.05%,氨基态氮含量分别增加了4.44倍,可溶蛋白含量上升了53.77%,说明枯草芽孢杆菌B3是发酵猪血粉的优良菌株。利用B3菌株进行发酵猪血粉条件的单因素和正交优化实验,考察温度、摇瓶转速、起始pH值、接种量、时间对发酵液水解度的影响。结果确定发酵血粉制备猪血活性肽的最佳水解条件为:温度30℃、转速160rpm、pH7.5、接种量6%、发酵时间50h,得到最大水解度为32.3%。采用微滤膜和不同截留分子量的透析袋对B3菌株猪血粉发酵液进行分离,冷冻干燥制备猪血活性肽粉。Tricine-SDS-PAGE电泳图谱表明,未经处理的发酵液和经过0.22μm微孔滤膜处理的肽粉分子量分布广泛,经透析袋分离的组分级效果明显,三者的分子量分布呈现递减趋势,可以分离得到较小分子量的多肽,且分子量明显小于珠蛋白的分子量14.4kDa。氨基酸分析表明,猪血多肽和猪血粉相比,组成氨基酸种类发生了变化,猪血粉、大于10kDa、1kDa~10kDa、小于1kDa猪血多肽的氨基酸组成分别为13种氨基酸和4种未知寡肽、13种氨基酸和4种未知寡肽、12种氨基酸和6种未知寡肽、8种氨基酸和7种未知寡肽,随着水解度增大、分子量减小呈现氨基酸构成种类减少和寡肽数增加。猪血多肽含有甲硫氨酸,而猪血粉中未检测出该种氨基酸,猪血多肽中均未检出苯丙氨酸,在分子量介于1kDa~10kDa样品多肽中未检出精氨酸、分子量小于1kDa样品多肽中末检出天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸和精氨酸。利用高效液相色谱法(HPLC)测定了猪血多肽对ACE的抑制效果。结果表明,大于10KDa,1kDa~10kDa,小于1kDa不同分子量段的多肽对ACE抑制率均随浓度增加呈现增长趋势,同时得到其IC50值分别为4.99 mg/ml、3.28 mg/ml、1.83mg/ml。