【摘 要】
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本研究选用乙醇梭菌蛋白(Clostridium autoethanogenum protein,CAP)作为替代鱼粉的蛋白源,以生长性能、体成分、脂肪代谢、免疫反应、抗病力、肠道微生物组成等作为指标,研究脂肪源比例、磷水平及补充胆汁酸对乙醇梭菌蛋白替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响。结果如下:1.CAP的粗脂肪含量低于鱼粉,为探究脂肪源对CAP替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响,本试验共配制4种等氮和等脂试验
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本研究选用乙醇梭菌蛋白(Clostridium autoethanogenum protein,CAP)作为替代鱼粉的蛋白源,以生长性能、体成分、脂肪代谢、免疫反应、抗病力、肠道微生物组成等作为指标,研究脂肪源比例、磷水平及补充胆汁酸对乙醇梭菌蛋白替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响。结果如下:1.CAP的粗脂肪含量低于鱼粉,为探究脂肪源对CAP替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响,本试验共配制4种等氮和等脂试验饲料:PC是高鱼粉(25%)对照饲料,在CAP替代PC饲料中40%的鱼粉的基础上添加不同的鱼油豆油比例分别配制成低豆油高鱼油饲料(LSO),中豆油中鱼油饲料(MSO),为高豆油低鱼油饲料(HSO)。饲喂凡纳滨对虾(初始体重1.79±0.02g)50天后进行取样,之后进行副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)攻毒试验。结果显示,HSO组对虾增重明显高于其它低鱼粉组对虾,攻毒后的累积死亡率比其它组低。攻毒后,HSO组对虾的肝胰腺Pen3和肠道NF-κB通路相关基因(dorsal、relish)表达比其它组高。肝胰腺的总抗氧化能力(T-AOC)随着饲料豆油水平的增加而明显升高。对虾肠道褶皱高度和肌层厚度与饲料豆油水平呈正相关。透射电镜切片显示,LSO组对虾的微绒毛受损、内质网发生肿胀。在各组中,LSO组对虾肠道微生物的多样性较高,海鞘杆菌属(Halocynthiibacter)和鲁杰氏菌属(Ruegeria)丰度明显升高,弧菌属(Vibrio)丰度明显降低。这表明在CAP替代鱼粉的基础上添加高比例豆油有助于改善凡纳滨对虾的生长性能、抗病能力和肠道形态,而添加较高的鱼油则可以提高对虾肠道微生物中有益菌的比例。2.CAP的磷含量低于鱼粉,为探究饲料磷水平对CAP替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响,本试验共配制4种等氮和等脂试验饲料:PC为高鱼粉(25%)饲料(总磷水平1.10%),NC为低鱼粉(15%)饲料(总磷水平0.96%),在NC的基础上分别添加0.8%和1.6%Na H2PO4配置为总磷水平为1.12%和1.27%的P1和P2饲料。饲喂凡纳滨对虾(初始体重1.79±0.02g)50天后取样并进行副溶血弧菌攻毒试验。结果显示,4组对虾在生长性能上没有明显差异。P1和P2组对虾肠道dorsal表达量明显低于NC组对虾。P2组对虾的攻毒累积死亡率明显低于NC组对虾。攻毒后,与PC组相比,NC组对虾肝胰腺的酚氧化酶原系统相关基因(pro PO、lgbp、ppaf)被抑制,而在P1组对虾中被激活。P2组对虾的AKP、T-AOC、ALT和AST活性较高。P1和P2组对虾肌层厚度较其它组对虾更厚,NC组对虾肠道发生了明显的应激损伤。P1组对虾肠道中假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)、Haloferula属和鲁杰氏菌属(Ruegeria)的丰度比其它组高,P2组对虾肠道中弧菌属(Vibrio)丰度比其它组低。这表明,总磷水平为1.12%的低鱼粉饲料可以改善肠道形态、增强免疫应答、提高肠道微生物中有益菌的比例,总磷水平为1.27%的低鱼粉饲料能够提高抗病力、增强抗氧化能力,但存在损害肝胰腺和肠道的可能,且增加了肠道弧菌的比例。3.饲料中添加胆汁酸通常可以改善动物营养吸收和免疫反应,为探究胆汁酸对CAP替代凡纳滨对虾饲料鱼粉的影响,本试验共配制5种等氮和等脂的试验饲料:PC为高鱼粉(25%)饲料,NC为50%鱼粉被CAP替代的低鱼粉饲料,在NC基础上分别添加0.03%、0.06%和0.09%胆汁酸分别为BA1、BA2和BA3。饲喂凡纳滨对虾(初始体重0.25±0.03g)56天后取样并进行副溶血弧菌攻毒试验。结果显示,BA2饲料明显缓解了对虾CAP导致的低生长效应。BA3组对虾的攻毒累积死亡率比其它组高。与PC组相比,BA2组对虾的SOD和T-AOC活性明显升高,ALT和AST活性降低。在各组中,NC组对虾肠道的bcl-2表达量较低,cyt-c和caspase3表达量较高。脂肪酶活性、ampk和srebp表达量随着胆汁酸添加水平升高而增加。NC组和BA3对虾的肠道和肝胰腺都呈现出损伤的迹象。这表明饲料中补充0.06%胆汁酸能够改善生长性能、抗氧化能力、肠道和肝胰腺健康,补充0.09%胆汁酸会降低抗病力、损害肠道和肝胰腺细胞,补充0.03-0.09%胆汁酸都能够加速脂肪转运。
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