目的探讨在ADSCs诱导分化为星形胶质细胞过程中线粒体凋亡与自噬的关系，从而为进一步增加获得的ADSCs源性星形胶质细胞数量并延长其存活时间具有重要的科学意义。方法1参照叶长青等的实验方法，将成人脂肪组织体外分离、培养为ADSCs，倒置相差显微镜下每日观察ADSCs的形态学变化。2将传至第3代的成人ADSCs，应用以含IBMX为主要成分的诱导剂诱导其向星形胶质细胞分化，按照诱导时间的不同分为诱导48h、7d、14d、21d组，并在倒置相差显微镜下观察诱导后细胞形态学的变化。3应用免疫细胞化学法和Western-blotting分别检测未诱导的ADSCs及诱导分化48h、7d、14d、21d的星形胶质细胞特异性标志蛋白胶质纤维酸性蛋白（Glial fbrillary acidic protein, GFAP），Bcl-2蛋白家族蛋白Bcl-2、Bax及细胞色素C（Cytochrome C）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Cysteine aspartate specificprotease-3）及微管相关蛋白轻链3（Microtubule-associated protein light chain3,LC3）的表达。4流式细胞术Annexin/PI双染法检测未诱导的ADSCs及诱导后48h、7d、14d、21d时细胞的生存状态。5透射电子显微镜下观察诱导后14d的星形胶质细胞线粒体超微结构、凋亡及自噬现象。6MTT法检测ADSCs诱导分化为星形胶质细胞过程中细胞的生长状态。7统计学方法：所得实验数据应用Excel2003数据库整理，采用统计软件包SPSS17.0进行分析，数据均以（x s）表示，不同时间点间的比较采用单因素方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果1提取的原代ADSCs于24h时已贴壁，倒置相差显微镜下可见细胞呈三角形、短梭形。培养至7~10d时可见大量呈漩涡状排列的长梭形细胞。2诱导反应48h时，细胞折光性增强，部分细胞的胞体周围伸出细长突起，并有多个分支。诱导反应7d时，细胞胞体折光性显著增强，部分细胞呈现典型的星形胶质细胞形态，并交织成网状。诱导14d时，细胞胞体折光性较7d时更加增强，但细胞形态与7d时无明显变化。诱导21d时，细胞数量减少，细胞的突起较诱导14d时变短、变少。3免疫细胞化学结果显示GFAP在未诱导的ADSCs中无阳性表达，而在诱导后各时间点均可见阳性表达细胞，且在细胞体和突起部位的细胞质均呈阳性表达，GFAP的细胞阳性表达率仅7d与14d无统计学差异（P＞0.05），至诱导7d时GFAP的阳性表达率达到高峰（P＜0.05）。Bax、Bcl-2、Cyt-c、Caspase-3和LC3在未诱导的ADSCs和诱导反应的各时间点均可见阳性表达，而且阳性表达部位主要位于细胞核周围的细胞浆，而突起部位没有见到明显的阳性表达。Bcl-2的阳性表达率随着诱导时间的延长逐渐降低（P＜0.05），在未诱导的ADSCs和诱导后各时间点仅7d与14d无统计学差异（P＞0.05）。Bax、Cyt-c、Caspase-3、LC3的阳性表达率在未诱导的ADSCs和诱导后48h、7d、14d、21d之间均有明显统计学差异（P均＜0.01），至诱导14d时Bax、Cyt-c、Caspase-3、LC3的阳性表达率均达到高峰（P均＜0.05）。4Western-blotting结果显示，GFAP在未诱导组的ADSCs中无表达，随诱导时间的延长其表达量增加，至7d时达到高峰（P＜0.05）。Bcl-2的表达水平随着诱导时间的延长逐渐降低（P＜0.05）。LC3Ⅰ的表达随诱导时间的延长，逐渐降低（P＜0.05）。Bax、Cyt-c、Caspase-3及LC3Ⅱ的表达水平均逐渐增加，至诱导14d达到高峰（P均＜0.05）。5透射电子显微镜下可见到线粒体的超微结构，凋亡小体结构及自噬现象。6流式细胞术的检测结果显示，诱导反应过程中的细胞存活率随着诱导时间的延长逐渐下降，早期凋亡率、晚期凋亡或坏死率随着诱导时间的延长逐渐升高。7MTT的结果显示，随着诱导时间的延长，细胞的存活数量逐渐下降。结论1ADSCs在应用以IBMX为主要成分的诱导剂诱导分化为星形胶质细胞的第7~14d时处于最佳的存活和分化状态，此时可以终止反应，并对于所得的细胞进行筛选分离和保存，以便于进行相关的应用和研究。2在正常ADSCs中，经线粒体信号传导途径产生的凋亡和自噬反应较弱。3在ADSCs诱导分化为星形胶质细胞的过程中，线粒体凋亡和细胞自噬反应明显增强，但自噬反应不足以清除全部受损的线粒体，从而引发线粒体途径介导的细胞凋亡。