成肌纤维细胞(Myofibroblast)是一种多起源的异质性细胞，在愈伤反应(wound-healing response)中扮演十分重要角色，参与体内多种器官的纤维化进程，包括：肝纤维化，肺纤维化，肾纤维化，动脉粥样硬化，组织粘连，疤组织形成。体内多种细胞都具有分化或去分化成为成肌纤维细胞的潜力，如肝星状细胞，血管平滑肌细胞，内皮细胞等，越来越多的研究研究表明，胞外基质硬度和细胞骨架的收缩力在成肌纤维细胞分化过程中起着十分关键的调控作用。本文在成肌纤维细胞受到不同的基底拉力的情况下，应用蛋白印迹和免疫荧光法鉴的方法对成肌纤维细胞分化过程的变化进行初步探究。　　 主要研究工作和结果如下：　　 (1)机械拉伸加载装置的加工制作　　 根据基底膜形变原理，自行研制了单轴细胞拉伸装置。可以满足不同幅度的静态拉伸。　　 (2)成肌纤维细胞的获得与鉴定　　 对兔子进行腹腔手术，将鸡蛋蛋白切成小块植入兔子腹腔，然后手术缝合饲养，然后根据实验设计的不同时间，解剖兔子腹腔，取出蛋白块，并用胶原酶消化过滤.获得不同分化阶段细胞。经过蛋白印迹和免疫荧光法鉴定所获细胞，α-SM-actin为阳性，证明该细胞为成肌纤维细胞。因此可以利用该方法获取的细胞进行进一步的研究。　　 (3)对获取的不同阶段的成肌纤维细胞进行研究，掌握成肌纤维细胞分化的过程　　 对实验动物新西兰兔进行手术，植入的蛋白块，分别饲养三天，五天，七天，十天，十五天，然后取出蛋白块消化获取细胞，分别种在硅胶膜上，在培养40小时后进行免疫荧光观察，发现在三天没有成肌纤维细胞表达的平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)，在五天的成肌纤维细胞表达了平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)，因此我们认为在五天时成肌纤维细胞已经开始分化，同时我们对五天，七天，十天，十五天的细胞进行荧光强度检测，还发现在七天时表达了平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)有所下降，而后随着分化天数的增加而增加，这表明在成肌纤维细胞的分化过程中可能有一个回调机制。　　 (4)对分化起始阶段的细胞进行基底静态拉伸　　 选取了五天和七天的细胞对其进行基底静态拉伸，通过多次预试验和相关参考文献我决定采用施加3％和6％的拉力。通过免疫荧光检测，发现五天阶段成肌纤维细胞的对照、0-3％-6％拉伸、6％拉伸的荧光均值依次为238773.9±179214、385940.2士260968.3、355673.3士263254.2。七天阶段成肌纤维细胞对照、0-3％-6％拉伸、6％拉伸的成肌纤维细胞荧光均值依次为226225.5士147055.7、354569.9士274168.2、267602.2士244293.3。分析表明在经过拉伸后成肌纤维细胞的分化指标显著增加。而在从0-6％的拉伸后的成肌纤维细胞表达的α-SM-actin略低于0-3％-6％的拉伸处理，但从统计学角度二者没有显著差异。