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迟钝爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）是水产养殖业中危害极大的革兰氏阴性胞内寄生菌。目前已发现六型分泌系统（T6SS）效应子EvpP在其侵染过程中起重要作用。根据实验室前期研究结果,迟钝爱德华氏菌EIB202EvpP蛋白编码基因evpP的GC含量较整个基因组来说偏低,暗示其为水平转移获得。组蛋白样类核结构蛋白H-NS广泛存在于革兰氏阴性菌中,是调控多种基因表达的全局性转录调控因子。它可以特异性沉默通过水平基因转移而来的异源基因。本课题旨在研究迟钝爱德华氏菌H-NS对EvpP调控的分子机制。根据实验室前期完成的E. tarda EIB202全基因组信息,发现其基因组中有两个hns基因（ETAE1505和ETAE2968）,这两个hns基因所编码的蛋白与大肠杆菌H-NS的同源度分别为81%和60%。本研究首先构建hns突变株、过表达株及回补株并对各菌株的生长及致病力进行考察,发现hns突变对E. tarda的生长状态及对斑马鱼的半致死剂量均无明显影响。qRT-PCR检测发现H-NS对EvpP的转录具有抑制作用。在此基础上,通过体外EMSA实验考察H-NS与evpP基因的相互作用。结果表明H-NS可以直接结合evpP基因启动子和开放式阅读框（ORF）区域的序列,而H-NS-1505对该区域DNA的亲和力远大于H-NS-2968。进一步通过DNA酶I足迹实验获得了H-NS-1505对evpP基因区域结合位点的精确序列,证明H-NS可直接结合在evpP启动子上下游及ORF中的多个高AT含量序列上,进而通过H-NS自身多聚化及架桥作用来进行沉默作用。此外,前期研究发现E.tarda中双组份系统响应调节子EsrB对EvpP的转录具有激活作用,本研究探索了H-NS和EsrB对EvpP共调控的关系,采用细菌双杂交实验考察EsrB和H-NS之间是否存在相互作用,结果表明这两个蛋白并非通过直接结合而共同调控evpP基因的转录,但是否存在其他调控方式还需要进一步研究。本课题首次提出迟钝爱德华氏菌H-NS对T6SS效应子EvpP具有调控作用,为进一步探索T6SS作用机制及迟钝爱德华氏菌侵染机制提供参考,进而为筛选针对该菌病害有效的疫苗靶点提供理论基础。