滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）是一种常见的禽类病原体,能导致鸡群感染并发病,主要感染鸡或火鸡,引起鸡群急性或慢性亚临床型呼吸道疾病和传染性滑膜炎,给我国的养禽业造成了巨大的经济损失。目前,常用的MS诊断方法有病原分离培养,酶联免疫吸附试验（ELISA）,PCR法等。但在进行大规模的临床样本检测中,这些方法可能受到支原体生长缓慢、敏感性差和非特异性交叉反应的限制,所以建立一种快速、精度高、灵敏性好、操作简单、经济的检测方法对MS的早期诊断意义重大。本研究以MS为研究对象,建立了MS qPCR及MS抗体检测彩色微球试纸条的检测方法,为MS早期的临床诊断提供了有效的手段。MS qPCR检测方法的建立。首先制备MS阳性标准品,将MS菌株复苏扩大培养后提取基因组DNA,测其浓度并根据公式计算拷贝数,为qPCR的阳性标准品。将基因组DNA稀释至1×10~7,再10倍梯度稀释,按照Gen Bank上MS WVU-1853株vlhA基因序列设计引物MS-F/MS-R,通过优化引物、探针浓度和退火温度,建立了TaqMan荧光定量PCR方法的标准曲线,并将所建立的荧光定量PCR方法进行特异性、敏感性、重复性试验。并用建立的荧光定量PCR方法对来自滨州多个养殖场临床疑似MS感染鸡只的咽拭子、关节液拭子及MS临床发病期间的种蛋进行检测,并与常规PCR方法进行比较。结果显示,建立的标准曲线相关系数值（R~2）为0.999,扩增效率（E%）为96.494,呈良好的线性关系。该方法最低检测限度为1×10~0copies/μL,比普通PCR高,表明其敏感性高;将MS基因组和临床上常见支原体病原体,如鸡毒支原体、猪肺炎支原体疫苗株RM48、猪鼻支原体、绵羊肺炎支原体、牛支原体的基因组作为模板进行扩增,仅MS有扩增,对其他病原基因组均无扩增,表明其特异性较强;以三个浓度的基因组DNA为模板,分别进行三次qPCR检测,每次扩增进行三次重复,其变异系数均小于3%,表明重复性良好。用本研究建立的qPCR法和普通PCR分别检测28份临床样品,结果显示qPCR阳性检出率为89.28%,普通PCR阳性检出率为27.27%,其敏感性明显高于常规PCR法。实验结果显示,本研究建立的MS qPCR方法灵敏性、特异性、重复性好,为MS感染的早期诊断提供了一种快速定量检测方法。MS抗体检测彩色微球试纸条的研制。首先制备抗原,将培养好的MS浓缩、洗涤、破碎,取MS破碎的可溶性蛋白为致敏抗原与彩色纳米微球偶联,以三免MS的新西兰兔获得的抗体为质控抗体包被在质控线上,MS破碎的蛋白为标记抗原包被在检测线上,制备了MS抗体检测的彩色微球免疫层析试纸条。通过对检测条件的优化,特异性、敏感性、稳定性试验,建立了一种快速检测MS抗体的方法。特异性试验结果显示,用MS破碎蛋白致敏的微球仅与MS阳性血清反应产生条带,与禽其他常见病原体阳性血清未产生条带,表明其特异性强;敏感性试验结果显示,利用制备的彩色微球免疫层析试纸条对阳性血清连续10倍倍比稀释后检测,阳性血清10-3稀释度仍为阳性;稳定性试验结果显示,不同批次时间致敏的彩色微球于4℃保存与阳性血清反应均产生条带,稳定性好。以上表明,本研究建立的MS抗体检测彩色微球试纸条具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为MS抗体检测提供了一种快速、简便、经济的检测方法。综上,本研究成功建立针对MS的qPCR检测方法,具有敏感性高、特异性强、重复性好等特点;成功建立MS抗体检测彩色微球试纸条检测方法,该方法具有敏感、特异、快速、便捷等特点。上述两种快速诊断方法,均可快速有效的检测鸡群中是否有MS的感染,为大量、快速检测MS病原、抗体提供了有效方法。