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亚精胺(Spermidine)是生物体内一种重要的多胺,在有机体生命活动中扮演着重要角色,参与细胞迁移、细胞生长和肿瘤发生等过程,在DNA、RNA和细胞膜结构稳定的维持、蛋白质合成、离子通道调控中起着重要作用。亚精胺在分解代谢过程中会生成自由基等代谢产物,并影响细胞活力。亚精胺过量或不足都有可能诱导细胞凋亡,然而其导致人宫颈癌Hela细胞凋亡的机理尚未见报道。本研究选取Hela细胞为实验材料,用不同浓度亚精胺处理,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法探讨亚精胺的细胞毒性效应;采用高效液相色谱实验来验证亚精胺发挥作用的可能机制;采用Hoechst33258染色检测不同浓度亚精胺对Hela细胞凋亡的影响;同时采用试剂盒检测了细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量。研究结果如下:1.MTT实验结果显示,亚精胺处理Hela细胞24h后,15、25、50μM亚精胺可以显著降低Hela细胞活力(p<0.05),而75、100、125μM亚精胺则可极显著降低细胞活力(p<0.01),呈现浓度依赖性。2.0、20、40、60、80、100μM亚精胺处理Hela细胞24h,Hoechst33258染色实验显示40、60、80、100μM亚精胺可诱导明显的细胞凋亡,且呈现浓度依赖性。3.高效液相实验结果表明,在培养基中加入亚精胺(20μM)后,Hela细胞内亚精胺含量在1h达到最大值,说明亚精胺被Hela细胞所吸收。4.用60μM亚精胺处理Hela细胞不同时间(0、1、3、6、12、24h)后,细胞内GSH含量自3h开始已极显著降低(p<0.01),同时细胞内GSH/GSSG比率降低至1以下,表明细胞受到严重的氧化胁迫。5.亚精胺(40、60、80μM)可耗竭Hela细胞内的GSH,极显著降低细胞GSH/GSSG比率(p<0.01),使细胞受到氧化胁迫,导致细胞活力下降,诱导细胞凋亡。加入GSH供体——氮-乙酰半胱氨酸(NAC,2mM)可以回升细胞活力和细胞内GSH/GSSG比率,抑制细胞凋亡。综上,加入外源性亚精胺可以降低Hela细胞活力,诱导细胞凋亡。这可能是由于外源亚精胺被Hela细胞吸收,并在细胞内发生代谢,降低GSH/GSSG比率,使细胞受到氧化胁迫而最终诱导凋亡发生。