【摘 要】
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口腔癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,也是头颈部鳞癌的重要组成部分.尽管治疗措施已有改进,但近年来口腔癌的5年生存率提高不大,疗效不能令人满意.目前认为口腔癌形成是一个
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口腔癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,也是头颈部鳞癌的重要组成部分.尽管治疗措施已有改进,但近年来口腔癌的5年生存率提高不大,疗效不能令人满意.目前认为口腔癌形成是一个多步骤和涉及多基因的变化过程.目前口腔癌形成的分子生物学基础还远未明确.对口腔癌的遗传学的研究有助于对该疾病的了解和开辟新的治疗策略.基因高通量表达技术的出现为肿瘤基因学的研究提供重要的技术手段.抑制消减杂交(Subtractive Suppression Hybridization)是一种基于抑制PCR的差异基因表达技术,具有高效和相对简便的特点.目的:了解口腔癌与正常口腔粘膜差异表达的基因.材料和方法:口腔癌标本取自四川大学华西口腔医学院住院病例,各病例均经病理枪查证实.分别位于舌、颊、牙龈、口底和软腭.性别比4:1.平均年龄62.4岁.男性病例均有吸烟史,50﹪男性病例兼有嗜酒和吸烟史.正常口腔粘膜取自同组患者.将肿瘤标本等量混合.肿瘤和正常粘膜标本分别进行操作.Trizol法提取RNA,SMART法反转录和第二链合成.进行正向和反向差减.正向设口腔癌为目的基因群(tester),口腔粘膜为驱赶基因群(driver);反向中tester和driver与正向差减相反.差减后经2轮PCR反应扩增产物.连接效率和差减效率应用G3PDH基因测定.结果:差减后2轮PCR产物大小位于0.2-2kb间,呈带型丰富的条带.差减前后产物带型不同,差减效率检测显示结果较好.结论:获得较好的口腔癌与正常口腔粘膜间正反向差异表达基因文库.
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