RNA干扰HDAC1对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和周期的影响

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目的探讨通过RNA干扰下调组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡的影响。方法1、培养人乳腺癌MCF-7细胞株,选择对数生长期的细胞。以脂质体为载体将siRNA-HDAC1转染入MCF-7细胞。2、Real-Time PCR法和Western-blotting检测HDAC1基因的表达情况3、MTT法检测细胞增殖情况。4、用流式细胞术检测转染后细胞周期情况。结果1、通过siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞后,HDAC1mRNA的表达量在空白对照组、阴性对照组和siRNA转染组分别为为(1.000.03)、(0.830.04)、(0.150.02),可见siRNA转染组的表达量低于空白对照与阴性对照(P<0.05)。2、Western印迹法显示亦表明,siRNA转染组与空白对照组与阴性对照组相比,HDAC1蛋白表达量明显下降(P<0.05)。3、MTT法检测显示在细胞转染后,siRNA转染组的细胞在24、36、48、72h的吸光值分别为(0.430.005)、(0.69±0.006)、(1.200.004)、(1.390.002)。可见转染24h后出现细胞生长抑制,抑制效应随时间的增加而逐渐增加(P<0.05),其他两组生长情况无差异。4、转染下调HDAC1后,G1期、S期、G2细胞的比例分别为(59.62.97)%,(3.50.53)%、(36.91.43)%,S期所占的比例减少(P<0.05), G1所占的比例上升(P<0.05)。结论1、通过RNA干扰能有效的抑制人乳腺癌MCF-7细胞中HDAC1的表达2、HDAC1基因表达下调后,使细胞的周期发生改变,降低乳腺癌MCF-7细胞增殖能力。
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