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目的:探讨清肺化痰汤治疗哮喘小鼠的作用机制;证明清肺化痰汤可以通过抑制Clara细胞向杯状细胞化生,抑制黏液高分泌从而治疗哮喘。方法:实验一:将60只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型组、清肺化痰汤10.5、21.0、42.0 g/kg组及盐酸氨溴索组,每组10只。第1、8 d除正常对照组外小鼠腹腔注射0.5mLOVA混悬液(含100μg OVA,200μg氢氧化铝),第15-21d雾化,雾化结束1h后给药,末次给药24h后,部分小鼠检测小动物肺功能仪检测小鼠肺功能增强的呼气间歇(Enhanced Pause,Penh);取血,血常规;部分小鼠立即处死,取肺组织,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠肺组织炎症程度及病理变化;Masson染色检测气道重塑情况;AB-PAS染色检测气道黏液分布;Real time RT-qPCR检测小鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,Ccsp)及黏蛋白 5AC(Mucin 5AC,Muc5ac)mRNA水平;Western blot检测小鼠肺组织中CCSP及MUC5AC蛋白的表达。实验二:将90只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、DAPT组、VPA组、OVA组、OVA+DAPT组、OVA+VPA组、清肺化痰汤组、OVA+DAPT+清肺化痰汤组、OVA+VPA+清肺化痰汤组,每组10只。第1、8d除正常对照组、DAPT组及VPA组外小鼠腹腔注射0.5 mL OVA混悬液(含100 μg OVA,200 μg氢氧化铝),第9 d至第15 d,DAPT组、OVA+DAPT组及OVA+DAPT+清肺化痰汤组腹腔注射DAPT,VPA组、OVA+VPA组及OVA+VPA+清肺化痰汤组腹腔注射VPA,第15-21 d时,雾化,每次雾化结束1h后给药,末次给药24h后,处死小鼠,取肺组织,Real time RT-qPCR检测小鼠肺组织Notch1、Hes1、Ccsp及Muc5ac mRNA 水平;Western blot 检测小鼠肺组织中 Notch 1、Hes1、CCSP 及MUC5AC蛋白的表达;HE染色观察小鼠肺组织炎症程度及病理变化。结果:实验一:与正常对照组比较,模型组小鼠Penh值显著升高;血中嗜酸性粒细胞含量显著升高;肺组织形态、肺泡壁变厚;胶原沉积含量显著增加;远端气道黏液含量升高;肺组织中Muc5ac mRNA水平显著升高,Ccsp mRNA水平显著降低;肺组织中MUC5AC蛋白表达显著上调,CCSP蛋白表达显著下调。与模型组比较,各给药组小鼠Penh值显著降低;清肺化痰汤21.0、42.0 g/kg血中嗜酸性粒细胞含量显著降低;肺组织形态、肺泡壁变薄;清肺化痰汤10.5、21.0、42.0g/kg胶原沉积含量显著下降;清肺化痰汤10.5、21.0、42.0g/kg远端气道黏液含量降低;清肺化痰汤21.0、42.0 g/kg肺组织中Muc5ac mRNA水平显著降低,清肺化痰汤10.5、21.0、42.0 g/kg Ccsp mRNA水平显著升高;清肺化痰汤10.5、42.0 g/kg肺组织中MUC5AC蛋白表达显著上调,清肺化痰汤42.0 g/kg CCSP蛋白表达显著下调。实验二:与正常对照组比较,OVA组肺组织中Muc5ac、Notch1及Hes1 mRNA水平显著升高,Ccsp mRNA水平显著降低;MUC5AC、Notch1及Hes1蛋白表达显著上调,CCSP蛋白表达显著下调;肺泡壁变厚,炎性细胞数量显著升高。与OVA组比较,OVA+DAPT组肺组织中Notch1、Hes1及Muc5ac mRNA水平显著降低,Ccsp mRNA水平显著升高;Notch1、Hes1及MUC5AC蛋白表达显著下调,CCSP蛋白表达显著上调;肺泡壁变薄,炎性细胞数量显著降低;OVA+VPA组肺组织中Notch1及Hes1 mRNA水平显著升高,Ccsp mRNA水平显著降低;MUC5AC、Notch1及Hes1蛋白含量显著上调,CCSP蛋白含量显著下调;肺泡壁变厚,炎性细胞数量显著升高。与OVA+清肺化痰汤组比较,OVA+DAPT+清肺化痰汤组肺组织中Notch1 mRNA水平显著降低,Ccsp mRNA水平显著升高;Hes1蛋白含量显著下调;肺泡壁变薄,炎性细胞数量显著降低。OVA+VPA+清肺化痰汤组肺组织中Muc5ac、Notch1及Hes1 mRNA水平显著升高,Ccsp mRNA水平显著降低;MUC5AC、Notch1及Hes1蛋白含量显著上调,CCSP蛋白含量显著下调;肺泡壁变厚,炎性细胞数量显著升高。结论:清肺化痰汤可能通过抑制Notch信号通路,进而抑制Clara细胞向杯状细胞化生,减轻黏液高分泌从而缓解哮喘的反复发作。