目的:利用细胞培养技术原代培养骨巨细胞瘤单核基质细胞(Stromal-like tumorcells,Stc)并进行细胞鉴定,研究护骨素(Osteoprotegerin,OPG)对体外骨巨细胞瘤(Giant cell tumors,GCT)的抑制增殖、诱发凋亡的作用,为GCT新的辅助治疗方案的确立提供初步的实验依据。方法:用胶原酶-Ⅱ消化法体外分离培养8例新鲜GCT标本进行分离培养获得原代Stc并进行传代;四种传统方法测定细胞的基本性质;噻唑蓝比色法(MTT)测OPG对Stc的细胞毒性作用;流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测Stc细胞周期比例的改变以及凋亡率的变化情况;电镜观察实验组细胞核超微结构变化;DNA-Ladder测定OPG对GCT单核基质细胞DNA影响。结果:用胶原酶-Ⅱ消化的方法可以获得较高纯度的Stc,细胞的基本性质测定符合GCT主细胞性质;MTT法结果示:OPG浓度在100μmol/L范围内,随着OPG剂量的增加(0.1、0.01、1、10、100μmol/L),细胞的吸光度减小,OPG浓度为10μmol/L时,不同作用时间(12、24、48、72h),细胞的吸光度不同,48h组最小,差异有统计学意义(P＜0.05);流式细胞仪结果示:OPG以不同浓度(1、10、100μmol/L)分别作用48h后,细胞凋亡率及增殖指数(proliferation index,PI)分别与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);电镜观察到细胞胞质浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成;OPG作用48h(100μmol/L)后DNA-Ladder梯形条带明显,对照组细胞DNA条带只有一条。结论:在一定浓度范围内,OPG可能会抑制人GCT单核基质细胞增殖,诱导细胞凋亡。