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背景:已有流行病学研究及临床试验表明雌激素对阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)具有防治作用,基础试验也表明雌激素对中枢神经系统功能具有广泛和重要的作用,它不仅可以调节神经内分泌和生殖功能,而且对AD等一些神经退行性疾病有直接的保护效应,但目前证据仍不充分,机制也并未完全阐明.目的:研究雌激素是否可以抑制β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)诱导的大鼠神经细胞凋亡,研究此效应是否通过调节抗凋亡分子Bcl-2(B-cell leukemia/lymphoma 2)及线粒体途径中凋亡体成分凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1)的表达来介导,研究雌激素受体阻滞剂他莫昔芬(tamoxifen,TMX)对雌激素效应的影响,探讨雌激素神经保护功能和机制,为临床上雌激素替代治疗(estrogen replacement therapy,ERT)对一些神经退行性疾病如AD的防治作用提供更多依据,有助于ERT的进一步拓展.方法:取新生24h内SD大鼠的大脑皮质进行分离和体外原代培养,用神经特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)进行免疫细胞化学标记鉴定神经元.用Aβ(25-35)25μmol/L处理大鼠皮质神经元细胞24小时,与空白对照组相比观察Aβ(25-35)对原代培养的大鼠皮质神经元细胞凋亡的影响.0nmol/L,lnmol/L和30nmol/L 17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)联合或不联合1μmol/L的雌激素受体拮抗剂TMX预处理大鼠皮质神经元细胞48小时,再将神经元细胞暴露于25μmol/LAβ(25-35)中24小时,观察17β-E2及TMX对Aβ(25-35)诱导的神经元细胞凋亡的影响.用相差倒置显微镜、Giemsa染色及Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,测定乳酸脱氢酶(1actate dehydrohenase,LDH)释放率表示细胞的死亡率,用Hochest33258荧光染色及AnnexinV/PI双染色流式细胞术两种方法检测细胞凋亡率,用半定量RT-PCR方法检测Bcl-2及Apaf-1在转录水平的表达.结果:25μmol/LAβ(25-35)可以诱导大鼠皮质神经元细胞损伤及凋亡,下调抗凋亡分子Bcl-2的表达及上调凋亡体成分Apaf-1的表达.1nmol/L和30nmol/L 17β-E2预处理48小时显著抑制Aβ(25-35)诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤和凋亡的作用,并且显著抑制Aβ(25-35)下调Bcl-2及上调Apaf-1的表达的作用.1μmol/L雌激素受体阻滞剂TMX单用时对Aβ(25-35)诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡无影响,与17β-E2联合使用可以部分阻断雌激素抑制神经元细胞凋亡的效应,完全阻断雌激素上调抗凋亡分子Bcl-2的表达及部分阻断雌激素下调Apaf-1的表达.1nmol/L和30nmol/L17β-E2的神经保护效应无显著差别.结论:1.Aβ可以通过下调抗凋亡分子Bcl-2及上调线粒体途径中凋亡体的组成成分Apaf-1的表达诱导原代培养的大鼠皮质神经元细胞凋亡.2.雌激素可以通过上调抗凋亡分子Bcl-2的表达,下调线粒体途径中凋亡体的组成成分Apaf-1的表达,从而阻断Aβ诱导的线粒体凋亡途径来抑制Aβ诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡.3.雌激素抑制Aβ诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡的效应部分由雌激素受体介导.雌激素上调抗凋亡分子Bcl-2的表达可能完全通过雌激素受体途径,而下调Apaf-1的表达只部分依赖于雌激素受体.4.TMX对Aβ(25-35)诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡无保护效应.5.高雌激素浓度并不比生理浓度的雌激素更具有神经保护效应.6.雌激素可能通过抑制神经细胞凋亡来防治AD的发生及发展.