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目的研究广州地区携带blaCTX-M-15质粒的分子生物学特征。方法以2007年到2008年期间来源于广州9家医院的产ESBL的181株大肠杆菌和180株肺炎克雷伯菌为研究对象,PCR方法筛查携blaCTX-M-15菌株、确定大肠埃希菌的系统发育群和分析流行质粒的耐药基因构成,PFGE和MLST了解blaCTX-M-15阳性株的同源性, MIC检测菌株对常用抗生素的敏感性。血清凝集试验确定血清型。接合实验了解携带blaCTX-M-15质粒的可接合性,限制性内切酶分析质粒的同源性。二代测序技术对质粒的全序列进行测序。结果检出blaCTX-M阳性菌株243株,其中CTX-M-14和CTX-M-15分别为115和84株。37株大肠埃希菌和47株肺炎克雷伯菌携带blaCTX-M-15。blaCTX-M-15阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别用PFGE确定为28个和30个基因型。携blaCTX-M-15大肠埃希菌的系统发育群以D群(67.8%)和A群(21.4%)为主。大肠埃希菌的血清型呈散在分布,未发现025:H4血清型。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ST型无明显集中趋势。58个基因型的代表菌株中有40株可将携blaCTX-M-15的质粒传递给受体菌E.coli C600(Rifr),其中大肠埃希菌有19株、肺炎克雷伯菌有21株。35.7%(10/28)的大肠埃希菌中携带blaCTX-M-15的质粒大小为65KB,40.0%(12/30)的肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-15的质粒大小为92KB。通过限制性内切酶分析,发现存在2种流行质粒,命名为p15-e和p15-k。通过PCR调查, p15-e上存在blaCTX-M-15和ISEcpI; p15-k上存在blaCTX-M-15, blaTEM-1。分析p15-k全序列发现同浙江发现的质粒pKF3-94具有明显的同源性。结论广州地区CTX-M型ESBL主要以CTX-M-14为主;CTX-M-15位居第二位,但上升趋势非常明显。广州地区携带blaCTX-M-15的菌株主要以独立基因型为主,没有细菌克隆株大规模传播的证据。携带blaCTX-M-15的大肠埃希菌的种系发育群主要以D群和A群为主,同国外比较存在地域差异。广州地区携带blaCTX-M-15的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ST型和血清型均与国外报道存在差异。blaCTX-M-15存在于可接合性质粒上。大肠埃希菌中主要集中在大小约65Kb的质粒;肺炎克雷伯菌主要集中在92Kb质粒。广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中分别存在一个65Kb(pc15-e)和92KB(pc15-k)的流行质粒。质粒pc15-k和浙江发现的pKF3-94具有高度的同源性,提示中国国内可能存在一个携带blaCTX-M-15的流行质粒。