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目的:心血管系统疾病已成为当今严重威胁人类健康的重要疾病,动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是其中最常见的疾病之一。AS可引起冠状动脉粥样硬化性心脏病、卒中和外周血管疾病等多种疾病。吸烟是AS发病的危险因素,尼古丁为烟草中的主要有害物质,与AS的发生发展具有密切的联系。现有研究表明尼古丁可影响血管平滑肌细胞的表型转换。此外,有研究表明自噬可调控血管壁粥样斑块的进展,但尼古丁与自噬的关系尚未明确。我们研究旨在阐明尼古丁是否可通过自噬影响血管平滑肌细胞功能以及AS,及其具体的分子机制。方法:Apoe-/-小鼠高脂饮食饲养12周建立小鼠AS模型,同时给予皮下注射尼古丁,12周后取材,HE染色和油红O染色检测血管壁斑块形成,α-SMA免疫组化染色检测斑块内血管平滑肌细胞量。体外实验中,用尼古丁外源干预血管平滑肌细胞,Western blot检测自噬标志蛋白LC3II/I、P62变化,以及应用GFP-LC3荧光显像技术检测细胞内自噬小体的形成。应用自噬抑制剂确定自噬在尼古丁诱导血管平滑肌细胞中的作用。Transwell细胞迁移实验、划痕实验检测在各种干预下血管平滑肌细胞的迁移功能变化。Western blot方法检测LC3II/I、P62、胶原I型、α-SMA、SM22α、osteopontin、beclin-1及磷酸化IκBα、p65等的蛋白表达。免疫荧光方法直观地显示原位α-SMA蛋白的表达。应用DCFH-DA探针,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察细胞内氧化应激反应。结果:尼古丁可加重Apoe-/-小鼠AS,以及促使血管整体自噬水平增加,且斑块内血管平滑肌细胞含量增多。体外实验中尼古丁可促进血管平滑肌细胞发生自噬,还可促进血管平滑肌细胞的表型转换和增加细胞迁移能力、胶原I型表达,使用自噬抑制剂能在一定程度上抑制尼古丁对血管平滑肌细胞的作用。应用非特异性乙酰胆碱受体阻断剂HEX发现乙酰胆碱受体参与尼古丁诱导血管平滑肌细胞自噬和表型转换过程。DCFH-DA探针的流式及荧光图结果揭示了尼古丁可促进血管平滑肌细胞发生氧化应激反应,应用氧自由基清除剂NAC可抑制部分尼古丁诱导的自噬以及相应的迁移、分泌功能,说明氧化应激是尼古丁促进自噬发生的中间环节。此外,NAC还可下调尼古丁活化的NF-κB信号通路,应用NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082和小干扰si-p65,可降低尼古丁对血管平滑肌细胞自噬的促进作用,表明NF-κB参与尼古丁诱导自噬的过程。结论:尼古丁可通过乙酰胆碱受体/氧化应激/NF-κB信号通路促进血管平滑肌细胞自噬的发生,调控细胞的表型转换及迁移、分泌功能,进而加重AS。