支链氨基酸不同水平及其比例对瘤胃发酵参数和微生物菌群的影响

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本论文通过四个试验探讨了不同水平和比例的支链氨基酸对瘤胃发酵参数和微生物菌群的影响,首先研究了不同水平的支链氨基酸对瘤胃发酵参数和微生物菌群的影响,并且进一步研究了在等氮水平的情况下,不同的支链氨基酸的比例对肉牛瘤胃发酵参数和微生物菌群的影响,本研究分为四个部分。试验一不同水平的支链氨基酸和尿素对肉牛瘤胃体外发酵参数的影响本试验利用体外培养法研究不同水平(0、50、100和200mgN/L)的尿素,亮氨酸,异亮氨酸和缬氨酸对瘤胃发酵参数的影响。研究结果发现,尿素组的pH和氨氮浓度显著高于支链氨基酸组(P<0.05);亮氨酸和异亮氨酸组的微生物蛋白(MCP)的浓度高于尿素组(P<0.05);异亮氨酸组的乙酸和丙酸浓度高于其它组(P>0.05);而随着氮水平的提高,NH3-N和MCP浓度都显著的升高(P<0.05),支链氨基酸对瘤胃发酵参数的影响优于尿素,氮水平对瘤胃MCP浓度的影响大于不同来源的影响。试验二不同水平的支链氨基酸和尿素对瘤胃微生物数量的影响本试验利用体外培养法研究不同水平(0、50、100和200mgN/L)的尿素,亮氨酸,异亮氨酸和缬氨酸对瘤胃微生物数量的影响。研究结果发现,与0mgN/L相比,50mgN/L的亮氨酸组以及100和200mgN/L的异亮氨酸组的总厌氧真菌的数量显著升高(P<0.05);各个水平的缬氨酸,100和200mgN/L亮氨酸以及100mgN/L的尿素组中瘤胃球菌的数量显著升高(P<0.05);与0mgN/L相比,200mgN/L缬氨酸以及50和100mgN/L的尿素组产琥珀酸丝状杆菌数量显著升高(P<0.05),各个水平的亮氨酸与异亮氨酸组都显著降低了产琥珀酸丝状杆菌的数量(P<0.05),50和100mgN/L的尿素组的结构性碳水化合物降解菌(瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌)的数量高于支链氨基酸组;50mgN/L的亮氨酸和200mgN/L的异亮氨酸组中的非结构性碳水化合物降解菌(溶纤维丁酸弧菌)数量显著升高(P<0.05),各个水平的缬氨酸和亮氨酸组中的非结构性碳水化合物降解菌(嗜淀粉瘤胃杆菌和牛链球菌)的数量都显著升高(P<0.05),而100和200mgN/L。的尿素组中非结构性碳水化合物降解菌(溶纤维丁酸弧菌和牛链球菌)的数量显著低于0mgN/L(P<0.05)。试验三不同支链氨基酸的比例对瘤胃发酵参数和瘤胃微生物数量的影响本试验利用体外培养法研究不同含氮比例的缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸(2:2:2(A),2:3:1(B),1:3:2(C),3:1:2(D),2:1:3(E),1:2:3(F),3:2:1(G),所有比例的总含氮量为200mgN/L)对瘤胃发酵参数,牛链球菌和溶纤维丁酸弧菌数量的影响。研究结果发现,不同的支链氨基酸的比例对产气量和氨氮浓度无显著影响(P>0.05),缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸的比例为2:3:1时,原虫蛋白和MCP的浓度显著升高(P<0.05);提高亮氨酸的比例、降低异亮氨酸的比例有助于非结构性碳水化合物降解菌(牛链球菌和溶纤维丁酸弧菌)菌群数量的增加。试验四不同支链氨基酸的比例对瘤胃动态发酵参数和瘤胃微生物数量的影响在试验三的基础上,选取缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸含氮比例为(2:2:2(A组),2:1:3(B组),2:3:1(C组))三组,体外发酵0,3,6,12和24h,研究其对瘤胃发酵参数和微生物数量的影响。研究结果发现,24h时,A组和C组瘤胃液发酵产气量显著高于B组(P<0.05);3h时C组的pH最低,达到12h时,A组的pH显著低于B组(P<0.05);3h时B组的氨氮浓度显著低于其它两组(P<0.05),6h时C组的氨氮浓度最低(P<0.05);随着发酵时间的延长,原虫蛋白和菌体蛋白都有增加的趋势,发酵3h,6h和12h时C组的原虫蛋白显著高于其它两组(P<0.05),而在发酵的3h时B组的菌体蛋白则显著高于其它两组(P<0.05),发酵到12h时C组的菌体蛋白显著高于其它两组(P<0.05),3h时C组的微生物蛋白的浓度显著高于A组(P<0.05),12h时C组的微生物蛋白浓度显著高于其它两组(P<0.05),其它时刻它们的浓度无显著差异(P>0.05):6h时C组的牛链球菌的相对表达量显著高于A组和B组(P<0.05),24h时A组的此菌的数量显著高于B组和C组(P<0.05)。综上:支链氨基酸对瘤胃发酵参数的影响优于尿素,亮氨酸最有利于MCP的合成,氮水平对瘤胃MCP的影响大于氮来源:与支链氨基酸组相比,50和100mgN/L的尿素组更有利于结构性碳水化合物降解菌(瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌)数量的增加,而各个水平的支链氨基酸组比尿素组有利于非结构性碳水化合物降解菌(嗜淀粉瘤胃杆菌,牛链球菌和溶纤维丁酸弧菌)数量的增加;缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸的比例为2:3:1时有助于MCP的合成,不同的氨基酸比例对非结构性碳水化合物降解菌的数量的影响有时效性。
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