番茄茎叶提取物对萝卜蚜的生物活性及其活性物质的分离纯化和结构的初步解析

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本研究对24种植物材料采用室内离体叶片法对萝卜蚜(Lipaphis erysimi Kaltenbach)进行了生物活性的筛选。试验结果表明提取物浓度在40mg/mL时,博落回、何首乌、番茄、羊蹄、马尾松和云南干姜6种植物对萝卜蚜24小时后校正死亡率分别为79.4%、74.5%、92.9%、68.6%、60.2%、57.8%,其余植物提取物的24小时后校正死亡率都在50%以下。选择对萝卜蚜有高活性的植物番茄(Lycopersicon esculentum Mill)为进一步研究对象,进行了番茄茎叶粗提物对萝卜蚜的室内浓度梯度试验及田间小区药效试验。室内浓度梯度试验结果表明提取液浓度和杀虫效果呈正相关,其半致死浓度LC50为10.4mg/mL。田间小区药效试验结果显示,在浓度为30mg/mL时,提取液对萝卜蚜的防治效果达到了97.0%,该效果与化学药剂吡虫啉1.33mg/mL浓度下的防效无显著差异。采用液-液萃取法将番茄茎叶粗提物初步分离为石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相四个部分。用盆栽喷雾法对4个萃取相进行了活性跟踪试验,在浓度为20mg/mL时,以石油醚相和乙酸乙酯相的杀虫活性最为明显,24小时后校正死亡率均为98.3%。正丁醇萃取物24小时后校正死亡率为45.9%,水相为7.3%。选择杀虫活性较好的石油醚相进行浓度梯度试验,发现其杀虫效果和萃取相浓度成正相关,半致死浓度LC50为6.3mg/mL,该浓度低于粗提液的LC50液,说明石油醚相萃取物富集了有效成分。对番茄茎叶中杀虫活性成分进行了硅胶柱层析分离和纯化,经TLC检测,将相同或相似馏分合并,得到6个组分。通过活性跟踪,发现组分2活性最高为96.5%。继续将组分2经过硅胶柱层析、Sephadex LH-20制备纯化获得了活性化合物LH1,在浓度为4 mg/mL时,该化合物对萝卜蚜24h后的校正死亡率为78.6%。对该化合物进行核磁共振氢谱分析,显示分子中含有连氧氢,而核磁共振碳谱检测到分子中含有双键和连氧碳。根据关于茄科植物番茄的工具书和文献资料以及对试验过程的分析,推测活性物质是极性较小的脂肪酸酯类化合物。以上试验结果均为利用番茄茎叶开发可防治蚜虫的植物源生物农药奠定了基础。
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