Snail、E-cadherin、CD44v6蛋白及基因在宫颈癌中的表达研究

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本课题通过应用EliVisionTM Plus免疫组织化学技术(Immunohistochemistry, IHC)和原位分子杂交技术(In situ hybridization,ISH)分别检测宫颈慢性炎、宫颈鳞状上皮内瘤变(cercical intraepithelial neoplasia, CIN)、宫颈癌(Laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)组织中Snail、E-cadherin和CD44v6蛋白及其基因的表达情况,并主要探讨以下几个问题:探讨不同检测试剂盒对Snail表达的影响;Snail、E-cadherin、 CD44v6蛋白及基因在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系;Snail与E-cadherin、CD44v6在宫颈癌组织中的相互关系。收集解放军第251医院病理科2008-2010年存档的宫颈鳞状细胞癌术后及活检标本共70例及宫颈鳞状上皮内瘤样变(CIN)标本35例,慢性宫颈炎标本15例,挑选每例肿瘤组织最大面积的蜡块,石蜡切片常规4μm,65-70℃烤片1-1.5小时。采用EliVisionTM Plus免疫组织化学技术和原位分子杂交技术检测15例慢性宫颈炎、35例宫颈鳞状上皮内瘤变和70例宫颈鳞状细胞癌中Snail、E-cadherin、CD44v6蛋白及基因的表达;选取浓缩型和即用型Snail单克隆抗体为70例宫颈鳞状细胞癌免疫组化染色标记,浓缩型Snail以1:200浓度稀释;浓缩型Snail的表达率明显比即用型Snail高,且即用型阴性者部分浓缩型阳性,两者相比有显著统计学意义(χ2=4.145,P<0.05)。Snail蛋白及基因在慢性宫颈炎、宫颈鳞状上皮内瘤变、宫颈癌中的阳性率分别为(26.7%、20.0%)、(65.7%、60.0%)、(87.1%、80.0%),差异均有显著意义(P<0.05); Snail蛋白与基因表达之间无统计学意义(P>0.05)。Snail蛋白及基因在淋巴结转移组明显高于无转移组(P<0.05;P<0.05),而在不同年龄、FIGO分期、病理分级及浸润深度情况之间snail蛋白及基因表达水平无明显变化(P>0.05);E-cadherin蛋白及基因在慢性宫颈炎、宫颈鳞状上皮内瘤变、宫颈癌中的阳性率分别为(93.3%、93.3%)、(54.3%、48.6%)、(30.0%、21.4%),差异均有显著意义(P<0.05);E-cadherin蛋白及基因表达之间无统计学意义(P>0.05)。E-cadherin蛋白及基因在淋巴结转移组明显低于无转移组(P<0.05;P<0.05),而在不同年龄.FIGO分期、病理分级及浸润深度情况之间snail蛋白及基因表达水平无明显变化(P>0.05)。CD44v6蛋白及基因在慢性宫颈炎、宫颈鳞状上皮内瘤变、宫颈癌中的阳性率分别为(20.0%、13.3%)、(48.6%、42.9%)、(84.3%、78.6%),差异均有显著意义(P<0.05);CD44v6蛋白及基因表达之间无统计学意义(P>0.05)。CD44v6蛋白及基因在淋巴结转移组明显高于无转移组(P<0.05,P<0.05)、FIGO分期间有显著差异(P<0.05,P<0.05),而在不同年龄、病理分级及浸润深度情况之间CD44v6蛋白及基因表达水平无明显变化(P>0.05)。Snail、E-cadherin蛋白及基因在宫颈癌中的表达呈负相关(r=-0.400,P<0.01,r=-0.783,P<0.01);Snail、CD44v6蛋白和基因在宫颈癌中的表达呈正相关(r=0.420,P<0.01;r=0.348,P<0.01);E-cadherin、CD44v6蛋白及基因在宫颈癌中的表达呈负相关(r=-0.660,P<0.01,r=-0.745,P<0.01)。通过以上实验得出如下结论:即用型Snail抗体在宫颈癌中的表达存在假阴性,因此建议使用浓缩型Snail抗体;Snail蛋白与Snail mRNA、 E-cadherin蛋白与E-cadherin mRNA、CD44v6蛋白与CD44v6mRNA之间的表达无统计学意义,说明以上三种抗体蛋白水平与基因水平无明显差别;Snail、E-cadherin、CD44v6参与宫颈癌的发生、发展,且都与淋巴结的转移有关,可作为监测宫颈癌预后的标志物;Snail的表达与E-cadherin呈负相关、与CD44v6呈正相关,进一步表明三者在宫颈癌细胞增殖、浸润转移方面起着重要作用。
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