目的放射治疗是治疗头颈部等恶性肿瘤的有效手段之一,但是同时也带来了以记忆力减退为主要症状的认知功能障碍。海马在人类的情绪整合、学习、记忆等高级功能中占有重要地位,放射治疗引起海马损伤已经成为日益关注的重要课题。放射治疗引起的脑损伤还涉及到炎性反应,因此采取抗炎手段防治放射性脑病已经成为研究重点,而糖皮质激素已经广泛应用于临床,但是糖皮质激素如何防治放射性脑损伤的作用机制还未完全明了.本实验通过建立低剂量分割照射脑损伤模型,初步探讨糖皮质激素在放射治疗后海马损伤中的作用,为临床防治放射性脑损伤提供理论依据。方法将48只昆明小鼠随机分成空白组、30Gy模型组、模型+地塞米松治疗组、空白+地塞米松治疗组,共4小组,每组12只。在清醒状态下,用自制模具固定小鼠,放置于直线加速器平台上,照射源和平台之间放置带孔铅模,光源透过铅模孔发出光束精确定位照射脑部,2Gy/次,5次/周,连续照射3周,累计剂量30Gy。放射后模型+地塞米松治疗组及空白+地塞米松治疗组.分别给予地塞米松(dexamethasone, DXM)1mg/KG腹腔注射,照射前、地塞米松治疗后通过Morris水迷宫测试小鼠的空间学习和记忆能力。DXM治疗后3周每组随机抽出6只采用石蜡切片免疫组织化学法的方法,观察DXM前、后星形胶质细胞(GFAP+)附性细胞数目,来评价神经干细胞分化和胶质细胞对DXM治疗前、后的反应情况,石蜡切片免疫组织化学的方法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)(?)的阳性细胞数目来评价DXM治疗前、后中枢神经系统神经炎性反应的情况,并做海马组织尼氏染色和HE染色等病理切片染色。同时每组随机抽取6只通过尾静脉注射伊文思蓝(EB),通过测定DXM治疗前、后脑组织EB含量和脑组织含水量的改变情况来评价照射后血脑屏障破坏程度。结果1.一般情况：放射后模型组和模型+DXM治疗组,出现易激惹、相互撕咬等精神症状,模型组出现彗星尾征(见附图)。模型组和模型+DXM治疗组照射后3周出现轻度毛发脱落,经糖皮质激素治疗后模型+DXM治疗组上述症状有所减轻。照射前各组小鼠体重无明显差别,照射后3周,模型组、模型+DXM治疗组体重与空白组相比出现明显差别,治疗后2周,模型+DXM治疗组小鼠体重恢复到空白组水平,模型组小鼠体重虽然出现恢复,但与空白组相比尚未出现明显差别。空白组、空白+DXM治疗组小鼠体重逐渐增加,未见有明显差别。2.行为学测试：照射前6周,空白组虽然穿越平台次数和第一次穿越平台时间未见有明显差别,但在第一象限和中环区活动时间明显增多,然而采用糖皮质激素干预后,上述的差别恢复到空白组水平。模型组小鼠在放射后6周不仅穿越平台的次数明显下降,第1次找到平台的时间也明显延长,然而采用激素干预后,穿越平台的次数、第1次穿越平台的时间、在各象限和各环寻找平台的时间未见有明显差别。空白+DXM治疗组和模型+DXM治疗组行为学测试未见有明显差异。3.尼氏染色：放射治疗后模型组与空白组相比在海马CA1区尼氏细胞数目明显减少(P<0.01)。地塞米松治疗组与模型组相比在海马CA3区尼氏细胞数目增多(P<0.05)。空白+DXM治疗组与空白组相比在海马CA1区细胞数目增多(P<0.05)。其余各组未见有明显的差异。4.苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)简称HE染色法：放射后模型组与空白组相比细胞数目在海马CA1、CA2、CA4区均没有明显差异(P>0.05),模型+DXM治疗组与模型组相比在海马各区也均无显著的统计学意义(P>0.05),空白+DXM治疗组与空白组相比未见有显著差异(P>0.05)。5. GFAP免疫组化：放射后模型组与空白组相比在海马CA1、CA2、CA3、CA4各区GFAP阳性细胞表达上调(P<0.05),模型+DXM治疗组与模型组相比在海马CA1、CA2、CA3、CA4各区GFAP阳性细胞数目表达增加(P<0.05),空白+DXM治疗组与空白组相比在海马CA3区阳性细胞数目表达增加(P<0.01)。6. TNF-α免疫组化：模型组与空白组相比在海马CA2、CA3、CA4区TNF-α阳性细胞数目表达明显上调(P<0.05),模型+DXM治疗组与模型组相比在海马CA2、CA3、CA4区TNF-a阳性细胞数目表达显著下降(P<0.05)。空白+DXM治疗组与空白组相比在CA4区阳性细胞数目表达明显增加(P<0.05)。7.放射后血脑屏障的改变：放射后模型组与空白组相比脑组织含水量、EB含量显著增加(P<0.01)。模型+DXM治疗组与模型组相比脑组织内含水量、EB含量明显降低(P<0.05),空白+DXM治疗组与空白组相比没有明显的统计学意义(P>0.05)。结论1.低剂量分割颅脑照射可以引起与海马损伤有关的行为学改变。2.糖皮质激素治疗后海马区GFAP、TNF-α明显表达下调,脑组织内EB含量、含水量也有明显降低。