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目的:研究骨形态发生蛋白2功能多肽的骨诱导活性。方法:FMOC/tBu固相多肽合成法合成P17,取少量样品做质谱分析和色谱分析确定P17分子量和纯度。SD大鼠间充质细胞体外培养,将P17以生理盐水溶解,并配置10μg/ml和30μg/ml的两种溶液,添加到大鼠间充质干细胞完全培养液中。2周和3周时显微镜下观察细胞生长情况及检测碱性磷酸酶的活性。结果:FMOC/tBu固相多肽合成的P17的平均分子量为2023.67,与理论上设计多肽的分子量一致;高压液相色谱仪显示合成的活性多肽纯度为96%,达到实验的要求。随着培养时间的延长,各组细胞ALP活性均持续增高。2周和3周时,30μg/ml组ALP含量均高于10μg/ml。结论:通过固相多肽合成法合成的P17体外具有诱导活性,浓度30μg/ml组的诱导活性优于10μg/ml组。目的:制备α型半水硫酸钙(α-CSH)和矿化胶原(nHAC)复合的骨修复材料,测试其不同组分的理化性质、降解性能和力学性能;将α-CSH/nHAC与BMP-2功能多肽P17复合,测定其体外释放性能。方法:1.将矿化胶原含量为0%、5%、10%和20%与α-CSH混合,取不同配比的混合材料2g与去离子水按不同液/固比混合均匀成浆体,移至5ml注射器内,在材料保持良好可注射性的前提下,记录此时液固比。2.研究不同的液固比、矿化胶原含量、促凝剂的含量与固化性能的关系。3.不同组份的人工骨固化后,置于万能材料试验机,测试材料的力学性能。4.将模具中固化的样品放入模拟体液中,测试其降解率。5.将模具中固化并负载P17圆柱状材料放入模拟体液中,测定材料的释放性能。结果:(1)矿化胶原的含量与液固比有一定的联系,随着矿物化胶原含量增加,其液固比也需增加,才能良好注射性。(2)随着矿化胶原含量及液固比的增加,其凝固时间也不断的增加,促凝剂CSD的加入可大大缩短其凝固时间。根据组份不同其凝固时间可以调节在4.3±0.6分钟至169±22.3分钟。(3)随着液固比的增加和矿化胶原含量的增加,材料的压缩强度从最高的18.3±2.3兆帕降低为1.5±0.5兆帕。(4)液固比增加,材料的降解速率增加;相同的液固比条件下,矿化胶原含量越多降解速率越慢;促凝剂和功能多肽P17对复合材料降解速率没有显著影响。(5)硫酸钙/矿化胶原可作为P17的缓释载体,体外呈持续性释放,释放时间可持续21天以上。结论:硫酸钙/矿化胶原是一种具有原位自固化性能的可注射骨修复材料,其可作为BMP-2功能多肽P17的载体。目的:研究BMP-2功能多肽P17/硫酸钙/矿化胶原修复骨缺损的能力。方法:新西兰白兔45只,双侧股骨髁部制作腔隙性骨缺损,深度10mm,直径7mm。动物随机分为三个组,即空白组(A组)、硫酸钙/矿化胶原组(B组),P17/硫酸钙/矿化胶原组(C组)。植入相应的材料,术后对动物进行大体观察,术后4、8、12周分批处死动物,进行X线和Micro CT检测、组织学观察,比较各组材料修复骨缺损的能力。结果:大体观察:所有动物均在术后1小时苏醒,当天可站立,术后第2天可自由活动。A组一只出现手术部位骨折,补充一只。其余动物无明显并发症发生。伤口处无明显红肿发生。膝关节活动度尚可。X线观察:A组:12周时骨缺损依然明显,骨缺损边缘模糊,少量新生骨生成。B组:术后4周可见材料部分降解,仍有部分材料影像,骨缺损边缘模糊,少量新生骨生成;术后8周材料几乎完全降解,缺损区域仍然可见,但修复效果明显优于A组;术后12周骨缺损大部分修复,未见有明显剩余材料。C组:术后各时间点修复效果优于其它两组,12周时骨缺损完全修复,骨缺损处密度均匀。Micro CT检测:新生骨主要从缺损的边缘形成,向心生长。其中C组的骨缺损修复情况明显好于其他两组,术后12周时,A组骨缺损依旧很明显。组织学观察:在HE染色中,从4周到12周,A组新生骨面积由6.20±7.6%增加到15.40±7.30%,B组由32.20±6.26%增加到41.60±4.39%,C组由38.00±8.97%增加到67.20±6.89%,与C组相比,A组和B组的面积明显少于C组,差异具有统计学意义(p<0.05)。在天然猩红染色中,各个时间点,A组和B组的I型胶原纤维面积明显少于C组,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:将P17/硫酸钙/矿化胶原植入动物体内修复股骨髁临界骨缺损,其修复效果比硫酸钙/矿化胶原好,P17/硫酸钙/矿化胶原是一种理想的骨组织工程修复材料,能有效地促进骨缺损的修复。