肝再生过程ADAMs和MDC15的动态变化及其降解分析

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本文用酶的原位复性电泳和Westernblot(免疫印迹技术)等方法分析了部分肝切除(PH)和短间隔连续部分肝切除(SISPH)后的肝再生过程中肝组织和肝细胞中的ADAMs和MDC15的种类及其动态变化。 结果表明:(1)肝组织中主要含有75kDADAMs和140kDMDC15,肝细胞则主要含有37、35kDADAMs和58kDMDC15;(2)PH后的肝再生过程中,肝组织75kDADAMs量的变化与DNA合成正相关,140kDMDC15的含量在PH后2~76h,随恢复时间的延长而增多,至96~144h开始下降,逐渐恢复至正常水平;(3)SISPH后的肝再生过程中,肝组织75kDADAMs和140kDMDC15的动态变化与PH后的变化相似;(4)肝再生过程中,肝组织ADAMs和MDC15含量的变化与中性蛋白水解酶(主要是MMPs)活性负相关;(5)肝细胞分离过程中,EDTA对ADAMs和MDC15的降解作用最低,胰蛋白酶对ADAMs和MDC15的降解作用较低,胶原酶对二者的降解作用最严重,推测ADAMs和MDC15可能含有胶原酶的活性位点;(6)ADAMs和MDC15的降解具有pH依赖性,其降解的最适pH为3.5~4.0;(7)(8)分析体外因子对ADAMs和MDC15降解的作用表明,不同金属离子和蛋白水解酶抑制因子对二者的降解作用相同,说明体内有多种蛋白水解酶参与其降解过程。
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