论文部分内容阅读
本论文由两部分组成,分别为文献述和实验研究。文献综述分为《自然杀伤细胞分子生物学特征研究进展》和《Th17/Treg平衡与肿瘤转移的关系》两篇,第一篇主要介绍自然杀伤细胞(NK细胞)分化、发育和主要功能,阐明NK细胞发挥细胞毒作用的主要分子表位;第二篇综述文献介绍辅助性T细胞17(Th17细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)的分化过程及主要功能;简要阐述在不同免疫微环境条件下,CD4+T细胞分别发化成Th17细胞和Treg细胞,同时产生相应细胞因子,发挥不同免疫作用。Th17细胞主要通过放大炎性反应、介导中性粒细胞活化有效介导炎性反应;Treg细胞主要对免疫系统进行准确的抑制性调节作用恶性肿瘤逃避免疫监视,形成肿瘤免疫逃逸能力是发生转移的基础,作为先天性免疫系统的主要监视细胞,NK细胞发挥着重要的作用,而其表面特定分子的表达情况,可以从侧面揭示肿瘤发生时NK细胞所处的功能状态。Th17细胞和Treg细胞在肿瘤免疫应答中其相反相成的作用,二者的分化水平和肿瘤发生发展的关系密切。因此,控制NK细胞的功能,尤其是其表面活性分子的表达,调节Th17细胞和Treg细胞的分化是当今肿瘤治疗学研究的重要课题,中医药在调节NK细胞、Th17细胞及Treg细胞方面表现出了一定的选择性,这种选择性是否跟药物的归经理论有一定的联系,还需要进一步研究。目的:观察不同归经补益类中药方剂在治疗肺转移癌的疗效差异,从免疫细胞水平研究这种选择性调节作用,为中药归经理论的现代研究提供实验依据。方法:实验使用雄性BALB/c小鼠,随机分为4组,即补中益气汤组(补中组),十全大补汤组(十全组)、模型对照组(模型组)和空白对照组(空白组),每组10只。除模型对照组小鼠外,其余各组用尾静脉注射法接种小鼠结肠癌CT26.WTTCM37细胞,空白对照组尾静脉注射生理盐水。次日开始对补中组灌胃补中益气汤;对十全组灌胃十全大补汤;对模型组和空白组均灌胃去离子水。在灌胃第10天采用摘眼球法取小鼠外周血,并解剖小鼠取肺脏;用免疫抗体标记小鼠外周血,采用流式细胞仪检测NK细胞NKG2D和CD107a的表达情况,Th17细胞和Treg细胞的水平并进行分析。结果:本实验注射癌细胞各组小鼠肺组织全部可见明显转移灶,多发;与模型组比较,补中组NKG2D表达上调(p<0.05),其余3组与模型组比较没有差异;NK细胞CD107a表达情况各组之间没有差异;Th17细胞分化方面,空白组与其余各组之间均有明显差异(p<0.05),补中组和十全组与模型组比较,差异性分别为P补中=0.17,P十全=0.11;Treg细胞空白组与其余各组之间均有明显差异(p<0.05),补中组和十全组与模型组比较,差异性分别为P’补中=0.10,P’十全=0.48结论:肿瘤转移发生时,小鼠免疫功能处于抑制状态;补中益气汤对上调肠癌肺转移模型小鼠的NK细胞NKG2D的表达,而十全大补汤对该位点没有调节作用,分析两方药物,补中益气汤中的药物以归肺脾经为主,十全大补汤归肝脾经为主,可能肺经药物的这种归经差异导致了在NK细胞表面受体分子NKG2D表达的差异,为今后研究归经理论提供了思路。