鹿角托盘17KD蛋白的分离纯化及性质研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:menhuitou89
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目的:比较鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白的差异,对鹿角托盘中的特异蛋白进行分离纯化,并进一步研究其理化性质及细胞活性。方法:采用中空纤微膜技术分离提取鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白;应用SDS-PAGE法比较鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白差异;应用超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析等现代生物技术分离、纯化鹿角托盘特异蛋白;应用细胞培养技术、质谱技术等进行性质研究。结果:1、采用中空纤微膜分离技术,鹿茸、鹿角托盘及鹿骨的水溶性总蛋白收率分别为17.1%、8%、0.1%。2、鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白的差异极其明显,其中鹿角托盘17KD蛋白是鹿角托盘中的特异蛋白。3、首次从鹿角托盘中分离纯化出鹿角托盘17KD蛋白。分离纯化的鹿角托盘17KD蛋白经检测达到电泳和高效液相纯。4、对分离纯化的鹿角托盘17KD蛋白的细胞活性进行了研究,结果表明鹿角托盘17KD蛋白对Vero、L929等细胞增殖有明显的影响。结论:1、鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白差异明显。因此,SDS-PAGE法是鉴别鹿茸、鹿角托盘和鹿骨粉末的有效,快速,稳定,简便的方法;2、作为鹿角托盘中的特异蛋白,17KD蛋白具有明显的促细胞增值活性,为进一步研究鹿角托盘的药理活性及新药研发奠定了基础。
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