葛根为豆科植物野葛Pueraria lobate（Willd.）Ohwi的干燥根,始载于《神农本草经》,被列为中品,具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻、通经活络、解酒毒等功效。现代药理研究表明,葛根中主要含有黄酮类、三萜类、香豆素及葛根苷类、生物碱、氨基酸等化学成分,具有保护心脑血管、降压、降血糖、降血脂、抗氧化及调节免疫能力等多种药理作用。2015版《中国药典》仅将葛根素作为评价葛根质量的指标性成分,而中药本身成分复杂,其药效非单一成分起作用,且中药质量受产地、采收期等影响,一种或多种组分也难以全面反映葛根的药材质量。因此本课题从葛根主要的化学成分与生物活性两方面进行谱效关联,为后续葛根药材质量的控制方法提供一定的依据。且葛根作为一种药食两用的传统中药,葛根药材质量的不断完善也将利于葛根药材的综合性的利用与开发。目的:以不同产地葛根药材为研究对象,通过探索化学指纹图谱与生物活性的关系,为后续葛根药材质量的控制方法提供思路与方向。方法:1.有效成分提取:通过对不同的料液比、超声时间、超声温度、提取溶剂的考察,得到单因素实验结果,再运用Box-Behnken响应面设计得到优化条件,确定最佳提取工艺。2.指纹图谱构建:运用化学计量分析方法分别对40批葛根的指纹图谱考察不同批次之间的相似度,并用系统聚类分析和主成分分析对指纹图谱的共有峰的结果进一步的研究。3.有效成分含量测定:采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定葛根药材中葛根素、3’-羟基葛根素、葛根素芹菜糖苷、3’-甲氧基葛根素、葛根素-6’’-O-木糖苷、大豆苷、染料木苷、芒柄花素和大豆苷元9种有效成分的含量。以葛根素为内标物,建立一测多评的含量测定方法,并与外标法进行比较,验证所建一测多评方法的可行性及准确度。4.体外活性研究:对40批的葛根样品采用不同的体外抗氧化试验研究其抗氧化活性并通过α-葡萄糖苷酶活性抑制试验研究其降糖作用,最后以抗氧化能力和降糖能力作为评价指标,初步比较不同产地的葛根药材的差异性。5.谱效关系研究:以体外抗氧化活力和α-葡萄糖苷酶活性抑制能力为药效指标,用灰色关联度分析建立化学指纹图谱的共有峰与体外生物活性间的谱效关系。结果:1.确定葛根有效成分的提取的条件为超声时间22 min,液料比为220:1,甲醇浓度为72%,提取温度为40℃。2.葛根有效成分测定结果:40批葛根样品中9个黄酮类成分的含量在不同产地间含量存在差异,且在同一产地的也存在差异。其中除湖南张家界（S11）的葛根素含量低于2.4%以外,其余样品含量均符合药典规定,且不同产地的总异黄酮成分含量范围为4.77~17.44%,其中陕西安康岚皋县（S16）总异黄酮含量最高。并且建立的一测多评同时测定多种成分的含量测定经过方法学考察,确定该方法准确,可靠,具有可行性。3.HPLC指纹图谱研究:由相似度软件经分析最终获得23个共有峰,并指认出其中的9个峰。聚类分析将40批葛根分为两大类,主成分分析提取出三个主成分,方差贡献率为81.835%。4.体外活性研究:不同产地的葛根药材都有一定的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶活性抑制的作用,其中陕西、湖北、湖南产葛根的抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶活性抑制能力较好。5.谱效关系研究:基于抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶活性抑制能力分别从指纹图谱共有峰中筛选出关联度在0.700以上的色谱峰,与三种抗氧化活性关联度高的色谱峰有P1、P2、P5、P7（葛根素芹菜糖苷）、P9（葛根素-6’’-O-木糖苷）、P13、P15、P19、P20、P21、P22（芒柄花素）、P23（大豆苷元）;与α-葡萄糖苷酶活性抑制能力相关的峰为P1、P2、P3、P4（3’-羟基葛根素）、P5、P6（葛根素）、P7、P9、P11、P12（大豆苷）、P13、P14、P15、P16、P21、P23。结论:1.本课题研究通过高效液相色谱法所建立的含量测定、指纹图谱和一测多评的方法可用于葛根药材的质量研究,弥补了单一指标评价的不足,为葛根质量评价研究提供了新的方法。2.不同产地的葛根样品化学成分接近,但含量、抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶的活性抑制能力存在差异,不同产地的葛根质量可能不同,同一省份相近产地的质量也不一定相同。3.通过灰色关联度分析将葛根体外抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶的活性抑制能力的研究与化学指纹图谱相结合的方法,筛选出了与活性相关的色谱峰,为深入研究葛根药材的药效物质基础和完善质量评价方法提供了思路与参考。