背景急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）是一类造血干细胞恶性克隆性疾病,在我国属于高发性恶性肿瘤。随着新化疗药物的研发和治疗方案的改进,AML的治疗获得很大进展,但5年生存率仍不足30%。研究发现白血病难治和复发的根本原因是白血病干细胞（leukemia stem cells,LSCs）。因此治愈白血病的关键在于彻底清除LSCs。异基因造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation,HSCT）是目前治愈白血病的重要手段,其机制是移植物抗宿主白血病细胞效应。但LSCs往往能逃逸来自于供者的免疫细胞的杀伤。故一定要寻找能增强异体免疫细胞对LSCs杀伤能力的干预措施。三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）是中药砒霜的主要成分。已有研究报道ATO能够提高NK细胞对血液肿瘤细胞的杀伤作用,其机制是ATO可以诱导上调肿瘤细胞表面表达NKG2D配体。但是,目前关于ATO是通过何种机制诱导NKG2D配体表达增多的尚不清除。目的研究三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）对髓系白血病KG1a细胞表面NKG2D配体ULBP1的影响,并探讨其调节ULBP1表达的分子机制。方法1.用CCK8细胞增殖实验检测ATO对KG1a细胞的增殖抑制作用。2.荧光定量RT-PCR法检测ATO对KG1a细胞ULBP1mRNA表达的作用。3.流式细胞术检测ATO对KG1a细胞表面ULBP1蛋白表达的影响。4.加入咖啡因抑制毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶（ataxia telangiectasia mutated and RAD3-related kinase,ATM/ATR）,采用荧光定量RT-PCR方法观察咖啡因对ATO引起的KG1a细胞ULBP1 mRNA表达水平变化的影响。5.采用流式细胞术观察咖啡因对ATO引起的KG1a细胞ULBP1蛋白表达水平变化的影响。6.采用Western blot检测方法,观察ATO作用前后KG1a细胞中Chk1、Chk2蛋白表达水平的变化。结果1.不同浓度ATO均可抑制KG1a细胞的增殖,呈药物浓度依赖性,KG1a细胞对ATO的IC₅₀值为2.7μmol/L。2.ATO可使KG1a细胞ULBP1 mRNA表达升高,在ATO浓度为1、2、3、4、5μmol/L时,与不加药处理组相比,ULBP1 mRNA表达水平分别升高到（1.86±0.30）、（3.02±0.71）、（3.16±0.75）、（4.80±0.70）、（3.70±0.89）倍（P<0.05）。3.不同浓度ATO（1、2、3、4、5μmol/L）均可诱导上调KG1a细胞表面ULBP1蛋白表达（P<0.05）。4.用8mM咖啡因处理ATO损伤的KG1a细胞,ULBP1 mRNA表达显著降低,由不用咖啡因处理组的9.55±0.38倍降为6.36±0.93倍（P<0.05）。5.当咖啡因浓度为2、4、8mM时,ULBP1蛋白表达水平由不用咖啡因处理组的3.50±0.08倍分别降为2.17±0.07倍、2.02±0.06倍、1.75±0.06倍（P<0.05）。6.Western Blot结果显示用不同浓度ATO处理KG1a细胞48h,与不加药组相比,ATO可引起ATM/ATR通路中下游靶分子CHK1、CHK2磷酸化水平的增高,且具有浓度依赖性。结论ATO诱导上调KG1a细胞ULBP1表达,ATM/ATR通路可能参与了这一过程。